局部醛固酮系统介导高糖致人系膜细胞损伤记忆效应.pdf

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1、第二军医大学学报2012年l1月第33卷第l1期http://∞.ajsmrnu.C?l·1166·AcademicJournalofSecondMilitaryMedicalUniversity,Nov.2012,Vo1.33,No.11·论著·DOI:10.3724/SP.J.1008.2012.01166局部醛固酮系统介导高糖致人系膜细胞损伤记忆效应杜超,熊勤攀。,周波,苏红1.重庆医科大学附属第一医院内分泌科,重庆4000162.四川I省岳池县人民医院ICU科,岳池638300[摘要]目的研究高糖记

2、忆对人系膜细胞(HMCs)表达局部醛固酮系统、活性氧(ROS)及癌胚纤维连接蛋白(oncofe—talFN)mRNA水平的影响,并进一步探讨局部醛固酮系统在其中的作用。方法实验细胞分组如下:正糖组(NG,5mmol/L【)_葡萄糖培养2d)、高糖组(HG,25mmol/LD-葡萄糖培养2d)、记忆组(M,25mmol/LD-葡萄糖培养2d一5mmol/LD-葡萄糖培养4d)、记忆+依普利酮组(MY,25mmol/LD-葡萄糖培养2d一5mmol/LD-葡萄糖+10/~mol/L依普利酮培养4d)、正糖+依普

3、利酮组(NY,5mmol/LD-葡萄糖培养2d一5mmol/LD-葡萄糖+10gmol/L依普利酮培养4d)、持续正糖组(SN,5mmol/LD-葡萄糖培养6d)。荧光显微镜及酶标仪检测细胞内ROS水平,蛋白质印迹法检测醛固酮合酶蛋白(CYP11B2)水平,RT—PCR检测1113-羟基类固醇脱氢酶1、CYP11B2、oncofetalFNmRNA表达水平,激光共聚焦显微镜观察盐皮质激素受体(MR)表达及转位,放射免疫法测定上清液醛固酮水平。结果(1)HG组和M组诱导人系膜细胞CYP11B2mRNA及蛋白分

4、别为NG组的3.45、2.09倍和3.14、2.06倍,HG组和M组细胞上清液醛固酮含量分别为NG组的2.01、1.81倍(P均<0.05),HG组和M组均可促进MR蛋白发生核转位,定量分析示HG组和M组胞质/胞核荧光强度较NG组分别降低3O、21(P均

5、Cs存在高糖记忆效应,局部醛固酮系统可能介导了高糖致系膜细胞损伤的记忆作用。[关键词]局部醛固酮系统;代谢记忆;高糖;癌胚纤维连接蛋白;活性氧[中图分类号]R587.1[文献标志码]A[文章编号]0258—879X(2012)l1—1166一O6Localaldosteronesystemmediated“hyperglycaemicmemory”inhumanmesangialcellsDUChao,XIONGQin—pan,ZHOUBo,SUHong1.DepartmentofEndocrinology

6、,TheFirstAffiliatedHospital,ChongqingMedicalUniversity,Chongqing400016,China2.DepartmentofIntensiveCareUnit,Thepeople’sHospitalofYuechi,Yuechi638300,Sichuan,China[Abstract]0bjectiveToinvestigatetheeffectofhyperglycaemicmemoryonthelocalaldosteronesystem,rea

7、ctiveoxygenspecies(R0S)andexpressionofoncofetalfibronectin(oncofetalFN)mRNAinhumanmesangialcells(HMCs),andtofurtherunderstandtheroleof1oca1aldosteronesystemintheprocess.MethodsInthisstudyHMCsweredividedintothefollowinggroups:normalglucosegroup(NG,5mmol/LD-

8、glucosefor2days),highglucosegroup(HG,25mmol/LD-glucosefor2days),memorygroup(M,25mmol/LD-glucosefor2days5mmol/LD-glucosefor4days),memory4-eplerenonegroup(MY,25mmol/LD-glucosefor2days5mmol/LD-glucose4-10~mol/Le

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