局部醛固酮系统在高糖致人系膜细胞损伤记忆效应中的作用

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1、重庆医科大学硕士学位论文局部醛固酮系统在高糖致人系膜细胞损伤记忆效应中的作用姓名：杜超申请学位级别：硕士专业：内科学指导教师：周波201205重庆医科大学硕士研究生学位论文局部醛固酮系统在高糖致人系膜细胞损伤记忆效应中的作用摘要目的：研究高糖记忆对人系膜细胞(删Cs)表达局部醛固酮系统、活性氧(ROS)及癌胚纤维连接蛋白(oncofetalFN)mRNA水平的影响，并进一步探讨局部醛固酮系统在其中的作用。方法：实验细胞分组如下：正糖组(NG5mmo儿D．葡萄糖培养2天)、高糖组(HG25mmo儿m葡萄糖培养2天)、记忆组(M，25mmol／Lm葡萄糖培养2天_5mmo儿D．葡萄糖培养4天)、

2、记忆+依普利酮组㈣：25mmo儿D．葡萄糖培养2天一5mmol／LD．葡萄糖+10岬ol／L依普利酮培养4天)、正糖+依普利酮组(№5mmol／LD．葡萄糖培养2天_5mmo儿D．葡萄糖+10岬。儿依普利酮培养4天)、持续正糖组(SN，5mmo儿D．葡萄糖培养6天)。以I汀．PCR法检测醛固酮合酶(CYPllB2)、11p．羟基类固醇脱氢酶II(11pHSD2)、oncofetalFNmRNA表达水平，Westem．blot检测CYPl182蛋白表达水平，放射免疫法分析细胞培养液醛固酮水平，激光共聚焦显微镜(LSCM)观察盐皮质激素受体(凇)蛋白表达及转位，荧光显微镜和酶标仪检测细胞内RoS

3、水平。结果：(1)与NG组对比，HG组和M组诱导人系膜细胞CⅦ1182重庆医科大学硕士研宄生学位论文mIⅢA及蛋白分别为NG组的3．45倍、2．09倍和3．14倍、2．06倍，HG组和M组细胞上清液醛固酮含量分别为NG组的2．Ol倍、1．81倍(尸值均

4、显著下调，分别较M组降低35％、51％(P值均<0．05)。一．结论：删Cs存在高糖记忆效应，局部醛固酮系统可能介导了高糖致系膜细胞损伤的记忆作用。关键词：局部醛固酮系统，代谢记忆，高糖，癌胚纤维连接蛋白，活性氧4重庆医科大学硕士研究生学位论文’HYPERGLYCAEMICMEMORY’INHUMANMESANGIALCELLSMEDIATEDBYLOCALALDOSTERONESYSTEMABSTRACTObjective：，1'0inVestigatetheefrectofreVersalofhighglucosetono姗alglucoseonlocalaldosteronesyste

5、m，reactiVeoxygenspecies(ROS)andexpressionofoncofetaJ舶ronectin(oncofetalFN)mRNAinHumallmesangialcells(HMCs)，锄de)

6、【ploretherelationshipsoflocaIaldosteronesystemwithROSproductionandexpressionofoncofetalFNmRNA．Methods：HMCswerediVidedintofollowinggroups：nonllalglucosegroup(Nq5mmo儿D·glucosefor2days)，hi曲g

7、lucose黟oup(HG25mmo儿D。glucosefor2days)，memo巧铲oup(M，25mmol／LD-glucosefor2days一5mmo儿D-glucosefor4days)，memo叮+印1erenone黟oup(MY，25mmol／LD-glucosefor2days_5mmo儿D．glucose+lO岬ol／Leplerenonefor4days)，nonnalglucose+eplerenonegroup(NY，5mmol／LD‘glucosefor2days_5mmol／LD-glucose+1OIlmol／L印1erenonefor4days)，staMe

8、nomalglucosegroup(SN，5mmol／I。D．glucosefor6days)．ThemRNAexpressionofAldosteronesynthaSe(CYP11B2)，1lp—hydroxysteroiddehydrogenaSetype2(11pHSD2)andoncofetalFNweredetectedbyImPCR．CYPllB2proteinexpressionwaSdete