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《小干扰RNA下调GLI1基因的表达对MKN28细胞转移侵袭行为的影响.pdf》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、·86·中华临床暌师杂志r电子版)2014年9月第8卷第l8期ChinJClinicians(E1cctrorficEdition),Seotember15。2014,V01.8,NO.18基础论著小干扰RNA下调GLI1基因的表达对MKN28细胞转移侵袭行为的影响李晓伟瞿颖李建芳蔡劬计骏刘炳亚【摘要】目的利用siRNA技术下调GLI1基因的表达,在体外研究GLI1对MKN28胃癌细胞侵袭转移能力的影响。方法脂质体法将GLI1siRNA转染MKN28胃癌细胞,采用RT-PCR观察GLI1siRNA转染前后GLI1在mRNA水平的变
2、化情况。培养MKN28胃癌细胞,将细胞分为转染GLI1siRNA组、阴性siRNA组和对照组后,分别采用Transwell小室法检测各组细胞的侵袭和转移能力。结果转染GLI1siRNA后GLI1基因表达在24h和48h明显下调。侵袭和转移实验显示:GLI1siRNA组侵袭和转移细胞数目均低于阴性siRNA组和对照组(P3、浸润;小干扰;GLI1lnhibitionofGLI1throughsiRNAafectsmetastasisandinvasionofhumangastriccancercelllineMKN28LiXiaowei;QuYing,LiJianfang,CaiQu,JiJun,LiuBingya."DepartmentofInterventionalRadiology,EasternHepatobiliarySurgeryHospital,Shanghai200438,ChinaCorrespondingauthor:LiuBin4、gya,Email:Liubyrj@yahoo.com.cn[Abstract]ObjecfiveToinvestigatetheinvasionandmetastasisabilityofGLI1onMKN28cellsinvitrowimsiRNA.mediatedinhibitionofGLI1.MethodssiRNAtargetingGLI1mRNAwastransfectedintoMKN28ceils,andGLI1expressionwasdeterminedbvRT.PCR.MKN28cellwerecultur5、edinvitroanddividedintoGLI1siRNAgroup,negativesiRNAgroupandcontrolgroup.InvasionandmetastasisofMKN28ceilswereassessedbytranswellchamberassay.ResultsGLI1siRNAsignificantlyinhibitedtheexpressionofGLI1inMKN28eelllineatmRNAlevels.ThenumberofinvasionandmetastasiscellsofMKN6、28cellsinGLI1siRNAgroupweresignificantlylowerthanthoseinnegativesiIAgroupandcontrolgroup(allP<0.05).ConclusionTransfectionofGU1callinhibitGLI1expression。thussuppresscellinvasionandmetastasisofMKN28cells.111ismayprovideanewtherapytargetforgastriccancer.[Keywords]Stomac7、hneoplasms;Neoplasmmetastasis;Neoplasminvasiveness;Smallinterferencing;GLIl胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,其主要致能发挥重要作用,而GLI1作为HH信号通路的转录死原因是肿瘤细胞的转移【l】。因此,抑制胃癌细胞因子激活并转录Tm-I信号通路大部分靶基因[2。】,的转移是最重要的治疗措施,然而目前肿瘤细胞转并有可能参与了胃癌细胞的侵袭和转移,因此,本移的机制并不十分清楚,这成为制约胃癌治疗的瓶研究将对GLI1基因在胃癌侵袭和转移中的作用进颈,因此,研究胃癌的8、浸润和转移机制有很重要的行探讨。临床意义。有研究表明Hedgehog(HIt)信号通路材料和方法在胃癌的发生发展,并且在胃癌的侵袭和转移中可一、主要试剂和材料DOI:l0.3877/cma.j.1ssn.1674-0785.2014.18.021胃
3、浸润;小干扰;GLI1lnhibitionofGLI1throughsiRNAafectsmetastasisandinvasionofhumangastriccancercelllineMKN28LiXiaowei;QuYing,LiJianfang,CaiQu,JiJun,LiuBingya."DepartmentofInterventionalRadiology,EasternHepatobiliarySurgeryHospital,Shanghai200438,ChinaCorrespondingauthor:LiuBin
4、gya,Email:Liubyrj@yahoo.com.cn[Abstract]ObjecfiveToinvestigatetheinvasionandmetastasisabilityofGLI1onMKN28cellsinvitrowimsiRNA.mediatedinhibitionofGLI1.MethodssiRNAtargetingGLI1mRNAwastransfectedintoMKN28ceils,andGLI1expressionwasdeterminedbvRT.PCR.MKN28cellwerecultur
5、edinvitroanddividedintoGLI1siRNAgroup,negativesiRNAgroupandcontrolgroup.InvasionandmetastasisofMKN28ceilswereassessedbytranswellchamberassay.ResultsGLI1siRNAsignificantlyinhibitedtheexpressionofGLI1inMKN28eelllineatmRNAlevels.ThenumberofinvasionandmetastasiscellsofMKN
6、28cellsinGLI1siRNAgroupweresignificantlylowerthanthoseinnegativesiIAgroupandcontrolgroup(allP<0.05).ConclusionTransfectionofGU1callinhibitGLI1expression。thussuppresscellinvasionandmetastasisofMKN28cells.111ismayprovideanewtherapytargetforgastriccancer.[Keywords]Stomac
7、hneoplasms;Neoplasmmetastasis;Neoplasminvasiveness;Smallinterferencing;GLIl胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,其主要致能发挥重要作用,而GLI1作为HH信号通路的转录死原因是肿瘤细胞的转移【l】。因此,抑制胃癌细胞因子激活并转录Tm-I信号通路大部分靶基因[2。】,的转移是最重要的治疗措施,然而目前肿瘤细胞转并有可能参与了胃癌细胞的侵袭和转移,因此,本移的机制并不十分清楚,这成为制约胃癌治疗的瓶研究将对GLI1基因在胃癌侵袭和转移中的作用进颈,因此,研究胃癌的
8、浸润和转移机制有很重要的行探讨。临床意义。有研究表明Hedgehog(HIt)信号通路材料和方法在胃癌的发生发展,并且在胃癌的侵袭和转移中可一、主要试剂和材料DOI:l0.3877/cma.j.1ssn.1674-0785.2014.18.021胃
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