外周血单个核细胞在Sonic hedgehog信号通路中的活化表达.pdf

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1、华普通外科学．献(电子版)2015年4月第9卷第2期ChinArchGenSurg(ElectronicEdition)，April2015，Vo1．9，No．2·论著·外周血单个核细胞在Sonichedgehog信号通路中的活化表达赵乾规梁森闫慧明z【摘要】目的探讨Sonichedgehog阻断抗体(ShhAb)对外周血单个核细胞(PBMCs)抗胃癌MC细胞作用的表达。方法Ficoll密度梯度离心法分离正常人PBMCs，并与胃癌MC细胞(GES一1细胞经亚硝酰胺类化合物处理)建立共培养体系；RT—PCR

2、观察Shh、Gli一1基因的表达并进行半定量数据分析；于共培养体系中加入Shh阻断抗体，流式细胞术检测CD3、CD5、CD69分子表达。结果RT—PCR结果显示Gli—lmRNA在MC+ShhAb细胞组值为0．2845~0．0025，低于MC细胞组的0．5167+0．0109(P

3、onichedgehog蛋白；GES一1细胞；MNNG；淋巴细胞ActivationofexpressioninperipheralbloodmononuclearcellsinSonichedgehogpathwayZhaoQiankun，LiaugSer~2,YauHuiming2．ShanxiMedicalUniversity,Taiyuan030001，China,"2theSecondHospitalofShanxiMedicalUniversity,Taiyuan030001，ChinaCor

4、respondingauthor：YauHuiming,Email：yanhuiming2003cn@126．com【Abstract】ObjectiveTodiscusstheexpressionofSonichedgehogblockingantibody(ShhAb)inperipheralbloodmononuclearcells(PBMCs)ofanti-gastriccancercells．MethodsHealthyhumanPBM—CswerecentfifugatedbyFieollde

5、nsitygradient(GES一1cellsweretreatedbynitriteamides)andgastriccancercellswereco—culturedwithMC．Toobservetheexpressionandsemi-quantitativeanalysisofShhandGli一1byRT-PCR，ShhblockingantibodieswereaddedintheCO—culturesystem，andtheexpressionofCD3，CD5，CD69wasassa

6、yedbyfloweytometry．ResultsRT—PCRshowedthatGli—lmRNAinMC+ShhAbcellgroupwas0．2845±0．0025，lowerthantheMCcellgroup0．5167±0．0109(尸<0．05)．FlowcytometryshowedShhblockingantibodiespromotedtheexpressionofCD3andCD69．ShhAbenhancedcellkillingPBMCsforMC．ConclusionShhA

7、bcanpromoteactivationofPBMCs，andenhancesanti-carcinogeniceffectofnitriteamides．【Keywords】Sonichedgehogprotein；GES一1ceils；MNNG；LymphocyteSonichedgehog(Shh)是刺猬因子(Hedgehog，异常与肿瘤、自身免疫性疾病的发生、发展密切Hh)家族成员之一，Shh信号通路参与动物胚胎的相关[。Shh抑制CD3抗体刺激T淋巴细胞的活细胞增殖、分化及器官形成⋯，其中包括

8、对T细胞化[5]。本实验通过人胃黏膜永生细胞GES一1经人的调控[。研究表明，Shh信号通路的异常激活与工合成亚硝基化合物(N—methyl—N一nitro—N—肿瘤形成有关，而T细胞介导的细胞免疫应答nitrosoguanidine，MNNG)处理后形成MC细胞这一过程模拟体外癌变的不同阶段[，并与人外周血单DOI：10．3877／cma．J．issn．1674-0793．2015．02．004个核细胞(peripheral