萝卜过氧化物酶基因Rsprx1对其抗氧化能力的影响-论文.pdf

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1、贵州农业科学2014，42(9)：40~42GuizhouAgriculturalSciences[文章编号31001—3601(2014)09—0516—0040—03萝卜过氧化物酶基因Rsprxl对其抗氧化能力的影响彭方林，王丽，穆春，王曦烨，李迎迎，王林嵩(河南师范大学生命科学学院，河南新乡453007)[摘要]为探讨萝卜过氧化物酶RSPRX1与其抗氧化能力的关系，采用RNAi技术干扰心里美萝卜(Raphanussativus)过氧化物酶基因rsprxl的表达，并测定萝卜中过氧化物酶活性、过氧化氢酶活性、过氧化氢和可溶性蛋白含量等生理生化指标。结果显示：RNAi可抑制萝卜rsp

2、rxl的表达，浸染后18d，过氧化物酶比活力降低幅度最大，较空载体组降低13。浸染后21d，可溶性蛋白含量降低幅度最大，较空载体组降低14，此时过氧化氢酶比活力和过氧化氢含量增加最明显，分别较空载体组增加82和8。由此，萝卜过氧化物酶基因rsprxl影响其他一些抗氧化物质的合成与代谢，从而影响萝卜的抗氧化能力。[关键词]抗氧化能力；过氧化物酶；RNA干扰；萝卜[中图分类号]$631．1；Q786[文献标识码]AEffectofPeroxidaseGenersprx1onAntioxidantAb⋯ItyinRaphanussativusPENGFanglin，WANGLi，MUChu

3、n，WANGXiye，LIYingying，WANGLinsong(CollegeofLifeSciences，HenanNormalUniversity，Xinxiang，Henan453007，China)Abstract：Theperoxidaseactivity，catalaseactivity，hydrogenperoxideandsolubleproteincontentinR．sativusweredeterminedbystudyingexpressionofperoxidasegenersprxlbymeanofRNAitechniquetodiscussthere

4、lationshipbetweenrsprxlanditsantioxidantability．RNAicaninhibitrsprxlexpression，andthespecificactivityofperoxidasedecreasesby13comparedwithnon—carrierCKafter18days’treatment．Thesolubleproteincontentdecreasesby149／6buttheperoxidasespecificactivityandhydrogenperoxidecontentincreaseby829／6and8compa

5、redwithnon—carrierCKafter21days’treatmentrespectively．Inconclusion，rsprxlinfluencestheantioxidantabilitybyaffectingsynthesisandmetabolismofantioxidantsinR．sativus．Keywords：antioxidantability；peroxidase；RNAinterference；Raphanussativus植物体在自身代谢过程中或受到外部环境胁迫rsprxl是王林嵩等[6克隆的一种萝b过氧化物酶的情况下产生活性氧等有害物质，而活

6、性氧含量的基因，它可参与花青素代谢并提高转基因植株的抗增加打破了原有的活性氧平衡，此时需要植物体内氧化能力[7和酵母菌的抗盐能力_8]，但与其他抗氧的抗氧化系统抵抗氧化损伤[1]。过氧化物酶(per—化酶的关系还有待深入研究。笔者通过抑制萝b体oxidase，POD)是植物体内抗氧化系统中的关键酶内过氧化物酶rsprxl基因的表达，探究其与植物的之一，它和超氧化物歧化酶(superoxidedismutase，抗氧化能力之间的关系，以期为生产中通过转基因SOD)以及过氧化氢酶(catalase，CAT)相互协调配提高植物的抗逆性提供理论基础。合，清除过剩的自由基，以提高植物抗逆性。S

7、OD1材料与方法催化超氧化物分解为基态氧和H。O。，CAT和POD均可分解产生的HO，不同的是CAT可以直接将1．1材料HO分解为水和氧，而POD在分解HO时还需要萝卜品种为心里美(RaphanussativusL．)。浸其他的氢供体_2]。但由于POD在植物体内的含量染用农杆菌菌株为杨少华等[g构建的含有基于萝b远大于CATL。因此，在植物遭受氧化胁迫时，清过氧化物酶rsprxl保守序列设计的干扰片段除H0z的关键酶POD及CAT也逐渐成为关注的pART