超顺磁性氧化铁微粒磁标记骨髓间充质干细胞效率实验研究-论文.pdf

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1、——534——生物医学T程与}临床2013年11月第17卷第6期BME＆ClinMed．November2013,Vt)1．17．N【l_6．基础研究·网络出版时间：2013—11-0215：09网络出版地址：http：／，www．enki．net／kcms／detail／12．1329．R．20131102．1509．004．html超顺磁性氧化铁微粒磁标记骨髓间充质干细胞效率实验研究王琦，王丽佳，刘响，时高峰摘要：目的探讨不同浓度超微超顺磁性氧化铁微粒(USPIO)与多聚左旋赖氨酸(PLL)标记大鼠骨髓问充质十细胞fBMSCs)的磁标记效率及对细胞生长活力的影响，

2、寻找最佳配比浓度。方法实验采用6周龄Wister近交系大鼠，150g芹右．雄性用贴壁法分离培养BMSCs。使用6nmUSPIO—PLL复合物标记BMSCs。实验分6组，对照组为未标记的BMSCs(A组)按照PLL的有无及PLL质量浓度梯度(0、0．25、0．50、0．75、1．O0b~g／mL)分为5个实验组(B～F组)；其中每个实验组再根据不同浓度铁离子与PLL结合(USPIO的终质量浓度分别为25、50、100、150咖L)。使用电子显微镜及光学显微镜观察标记后的BMSCs及BMSCs内的USPIO微粒BMSCs活力测定采用台盼蓝排除实验BMSCs生长曲线绘制采用

3、Mrr法。MRI观察体外标记后BMSCs的显影火焰法测量BMSCs内铁含量，验证铁含量与MRI信号的关系。统计学分析采用方差分析结果台盼蓝染色证实90％以上标记后BMSCs均拒染台盼蓝根据BMSCs生长曲线判断单纯使用铁离子质量浓度达到200g／mL时或PLL用量达1．00g／mL会对BMSCs的生长产生一定的抑制作用。火焰法测得单独USPIO标记BMSCs与USPIO—PLL标记BMSCs铁含量差异有统计学意义(P<0．05)T，WI及SWI序列图像从B组至F组信号强度逐级下降，反映出铁离子的变化情况结论使用USPIO(100g／inL)结合PLL(0．75I~g／

4、mL)标记BMSCs即对细胞活性和生长无不利影响．且标记BMSCs的信号强度较强。关键词：磁共振成像：超微超顺磁性氧化铁微粒；骨髓间充质干细胞中图分类号：R445．2：R318．08文献标识码：A文章编号：1009—7090(2013)06—0534—08ExperimentalstudyonmagneticlabelingofbonemarrowmesenchymalstemcellswithsuperparamagneticironoxideparticlesWANGQi，WANGLi-jia，LIUXiang，SHIGao—feng(DepartmentofCT

5、,FourthHospitalofHebeiMediccdUniversity,Shijiazhuang050011，Hebei，China)Abstract：0bjectiveToexploretheefficiencyofmagneticlabelingofbonemarrowmesenchyma1stemcellsfBMSCs1withsuperparamagneticironoxideparticlesfUSP10)anditsimpactoncellgrowth．MethodsSix—week—oldnlaleWisterinbreclratwithbody

6、weightof150gwassacrificed．BMSCswereisolatedandculturedbyadherentmethod．andlabeledwith6nmUSPIO_P．I．．Tcomplexes．Sixgroupsofcellsweresetup：theunlabeledBMSCswereusedascontrolgroup(groupA)andtheothercellsweredividedinto5experimentalgroups(groupBtonaccordedtothepresenceorabsenceofPLLandPLLcon

7、centrationgradient(0．O．25．0．50，0．75，1．00g，mL】．Ineachexperimentalgroup，FeionsofdifferentconcentrationswerebondtoPLL(finalconcentrationsofUSPIOwere25，50，100，and150咖L，respectively)．ThelabeledBMSCsandintracellularUSPIOparticleswereobservedwithelectronmicroscopeandlightmicroscope，th