超顺磁性氧化铁粒子标记的骨髓间充质干细胞移植延缓椎间盘退变的实验研究

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1、东南大学硕士学位论文超顺磁性氧化铁粒子标记的骨髓间充质干细胞移植延缓椎间盘退变的实验研究姓名：鲍军平申请学位级别：硕士专业：外科学（骨科）指导教师：吴小涛20080420中文摘要超顺磁性氧化铁标记的骨髓间充质干细胞移植延缓椎间盘退变的实验研究东南大学临床医学院研究生：鲍军平导师：吴小涛目的：1．评价超顺磁性氧化铁纳米粒子标记的兔骨髓问充质干细胞在椎间盘退变早期植入椎问盘后细胞外基质的表达情况，并用磁共振进行干细胞示踪。2．评价各组兔髓核内eonnexin43的表达情况。方法：采取体外细胞培养技术，体外纯化扩增兔骨髓间充质干细胞，并用氧化铁纳米粒子进行标记，于

2、退变手术当时植入手术节段椎问盘内。分别于2、4、6、8周用问苯三酚分光光度法测定蛋白多糖含量的变化；免疫组化法测定】I型胶原的含量变化。Western．bloting法测定第三代干细胞、正常髓核、退变髓核及实验组各时问点髓核组织connexin43的表达情况。利用磁共振扫描对标、记干细胞在椎问盘内分布进行示踪。结果：8周内实验组髓核蛋白多糖和II型胶原的含量明显较模型组高，与正常组含量相当；骨髓间充质干细胞植入后髓核组织connexin43的表达随着时间增加呈上调趋势；MR扫描T2WI发现4周左右干细胞即在髓核内均匀分布。结论：1．兔骨髓间充质干细胞移植可以

3、延缓甚至阻止髓核退变。2．移植后骨髓问充质干细胞缝隙连接通讯功能增强。3．骨髓间充质干细胞植入椎间盘后可在椎问盘内迁徙。关键词：椎『自J盘退变；髓核；骨髓间充质干细胞；干细胞移植；超顺磁性氧化铁：连接蛋白43英文摘要Anexperimentalresearch-Bonemarrow—derivedmesenchymalstemcellsmarkedbySPIOtherapyforlumbarintervertebraldiscdegenerationSchoolofClinicalMedicineSoutheastUniversityPostgraduate

4、：BaoJun-pingTutor：WuXiao—taoAbstractobjectve：1．1"oevaluatethetherapeuticefficacyoftransplantingbMMSCsthaticreasetheamountofproteoglyeanandcollagentypeIIcontentinearlydegeneratingintervertebraldiscs．2．Toevaluatetheexpressionofconnexin43innucleuspulposus．Methods：Aninvivomodelwasestab

5、lishedtoinvestigatethefeusibilityofbMMSCsthatculturedinvitroandmarkedwithSPIOretention,andsurvivedindiscspace．In2，4，6，8weeks，immunohistochemicalstainingWasusedtodeterminethechangeofcollagentypeIIcontent；spectrophotometryt0determinethechangeofamountofproteoglyeanwithphlorglucin01．We

6、stern—blotingv，aSusedtodeterminetheexpressionofconnexin43．MagneticresonancescanningWasalsoperformedtotracetheimplantedcellsindiscs．Result：bMMSCscouldmaIntainviabilityandproliferateintherabbitintervertebraldisc．TheamountofproteoglycanandcollagentypeIIcontentoftheintervertebralinmatr

7、ixsynthesisinexperimentgroupWasincreasedin8weeks．Nochangeswefoundinthemodelgroup．Theexpressionofconnexin43innucleuspulposusincreasedafterbMMSCstransplantation．MagneticresonancescanningdetectedthewholediscwascoverdbytransplanWxlcells4weeksaftertransplanted．Conclusion：1．Transplantedm

8、esenchymalstemcellsgalldel