瘦素促进肺成纤维细胞向肌纤维母细胞的转分化.pdf

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1、细胞与分子免疫学杂志(ChinJCellMolImmuno1)2015．31(2199·论著·文章编号：1007—8738(2015)02—0199—04瘦素促进肺成纤维细胞向肌纤维母细胞的转分化陈碧，吕茜，张淼，张毛为，刘文静，朱述阳(徐州医学院附属医院呼吸科，江苏徐州221004；徐州市心血管病研究所，江苏徐州221009)[摘要]目的探讨瘦素对肺成纤维细胞向肌纤维母细胞转分化的影响及其作用机制。方法体外培养HFL—1人胚肺成纤维细胞，用(0—200)ng／mL重组人瘦素(rHL)干预或联合转化生长因子B1(TGF-131)

2、处理HFL一1细胞，Westernblot法测定0【平滑肌肌动蛋白(oL-SMA)、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化的AKT(p-AKT)的表达。CCK．8法测定细胞增殖，ELISA测定细胞上清液1型胶原蛋白含量。结果(50、100、200)ng／mL的rilL处理HFL—I细胞48h，ot—SMA的蛋白表达水平均较对照组明显上调；与200ng／mLrilL或5ng／mLTGF一131单独处理的细胞相比，200ng／mLrHL和5ns／mLTGF一131联合处理HFL-1细胞48h，HFL·1细胞ot—SMA蛋白表达水平显著上调。r

3、ilL能够上调HFL．1细胞P-AKT的表达，LY294002可抑制rilL对HFL一1细胞or．一SMA表达的诱导作用。与对照组相比，(12．5、25、50、100、200)ng／mL作用72h，细胞存活率无显著性差异。(5o一200)ng／mLrHL作用48h，细胞上清液中l型胶原蛋白含量明显升高。结论瘦素能够促进肺成纤维细胞向肌纤维母细胞转分化，其作用机制与激活PI3K／AKT信号通路有关。[关键词]瘦素；肺成纤维细胞；肌纤维母细胞；转分化[中图分类号]Q254，R392-33，R563[文献标志码】ALeptinindu

4、ceshumanlungfibroblasttotrans·diferentiateintomyofibroblastCHENBi，LYuQian。，ZHANGMiao，ZHANGMaowei，LIUWenjing，ZHUShuyangDepartmentofRespiratoryMedicine，AfiliatedHospitalofXuzhouMedicalCollege，Xuzhou221004；XuzhouCardiovascularDiseaseInstitute，Xuzhou221009，China【Abstract

5、]0bjectiveToexploretheefectofleptinonthetransdiferentiationofhumanlungfibroblasttomyofibroblastanditsmechanism．MethodsHumanembryoniclungfibroblasts(HFL-1)werecultured／nvitroandtreatedwith50，100，200ng／mLrecombinanthumanleptin(rHL)aloneorincombinationwith5ng／mLtransfor

6、minggrowthfactor-131(TGF-~I)．。meproteinlevelsofco-smoothmuscleactin(a-SMA)，totalproteinkinaseB(AKT)andphosphorylatedAKT(P—AWl")inHFL-1weredetectedbyWesternblotting．111eproliferationactivityofHFL-1wasevaluatedbythecelcountingkit-8(CCK-8)．111elevelofcoilagentype1．nsupe

7、rnatantfluidofHFL-1wasdetectedbyELISA．ResultsAftertreatmentwith50．100and200ng／mLrilLfor48hours，a-SMAproteinexpressioninHFL-1wassignificantlyraisedascomparedwithcontrolgroup，Co-stimulationwith200ng／mLrilLand5ng／mLTGF．131increasedoc—SMAproteinexpressioninHFL-1remarkabl

8、yascomparedwiththetreatmentwith200rig／mLrilLor5ng／mLTGF-Blalone．LeptinpromotedtheexpressionofP-AKTinHFL-1，andthisefectwasblockedbyP