微小RNA-16对K562细胞向巨核细胞系分化的影响.pdf

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1、中国病理生理杂志ChineseJournalofPathophysiology2015,31(4):585-589·585·[文章编号]1000-4718(2015)04—0585—05微小RNA-16对K562细胞向巨核细胞系分化的影响史金龙一,刘峰,胡颖,袁玉林,卢运(武汉大学基础医学院解剖教研室,湖北武汉430071;荆州市第三人民医院普胸外科,湖北荆州434000)[摘要]目的:观察微小RNA一16(microRNA.16,miR.16)对人自血病细胞K562向巨核细胞系分化的影响,并初步探索其中可能的机制。方法:在K562细胞中通过转染miR一16模拟物(

2、mimics)或miR一16抑制物(inhibi—tor),实时荧光定量PCR检测miR一16的水平变化,通过流式细胞术检测巨核细胞系分化指标CIM1、CIM2b及CD61的表达。用Westernblotting检测miR一16对下游白血病癌基因(myeloblastosisoncogene,MYB)蛋白水平的影响,进而利用流式细胞术检测miR.16是否通过影响MYB调控CD41、CD42b及CD61的表达。结果:转染miR一16-mimics可显著升高K562细胞中的miR.16水平并促进CD41、CD42b及CD61的表达(P<0.05),而转染miR-16.i

3、nhibitor可明显抑制K562细胞中的miR.16水平同时降低CD41、CD42b及CD61的表达(P<0.05);Westernblotting证实miR-l6可调控MYB蛋白水平,而沉默MYB可逆转miR-16对CD41、CD42b及CD61表达的调控作用。结论:miR.16可通过调控MYB的表达,调节人白血病细胞K562向巨核细胞系分化的能力。[关键词]微小RNA.16;白血病癌基因;巨核细胞系分化;血小板[中图分类号]1/558;R363.2[文献标志码]Adoi:10.3969/j.issn.1000.4718.2015.04.002Efectofmi

4、R-16onmegakary0cyticdiferentiationofK562cellsSHIJin-long,LIUFeng,HUYing,YUANYu-lin,LUYun(DepartmentofAnatomy,SchoolofBasicMedicine,WuhanUniversity,Wuhan430071,China;DepartmentofGeneralandThoracicSurgery,JingzhouThirdPeople'sHospital,Jingzhou434000,China.E—mail:2297308442@qq.con)[ABSTRA

5、CT]AIM:ToobservetheefectofmicroRNA一16(miR·16)onthemegakaryocyticdifferentiationofK562cells.andtoexplorethepotentialmechanism.METHODS:miR一16wasover—expressedorsilencedbytransfeetionwithmiR一16mimicsorinhibitorinK562cells.ThelevelofmiR-16wasdetectedbyreal-timePCR.TheexpressionofCIM1,CD42b

6、andCD61,asmegakaryocyticdiferentiationmarkers,wasdetectedbyflowcytometry.TheeffectofmiR一16ontheexpressionofmyeloblastosisoncogene(MYB)wasmeasuredbyWesternblotting,andflowcytometrywasperformedtoconfiITflwhethertheefectofmiR一16onexpressionofCIM1.C1942bandCD61wasmediatedbyMYB.RESULTS:Tran

7、sfectionwithmiR一16mimicsdramaticallyelevatedthelevelofmiR一16andtheexpressionofCD41,CIM2bandCD61intheK562cells.TransfectionwithmiR一16inhibitordecreasedthelevelofmiR-16andtheexpressionofCD41,CD42bandCD61intheK562ceils(P<0.05).TheexpressionofMYBwasregulatedbymiR-16,andMYBsilencingrevers

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