清甲汤对实验性自身免疫性甲状腺炎的治疗作用.pdf

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1、·1784·中国中医急症2011年11月第20卷第11期JETCM．Nov．201l，Vo1．20，No．11·实验研究·清甲汤对实验性自身免疫性甲状腺炎的治疗作用谢荣鑫辽宁省丹东市中医院(辽宁丹东118000)中图分类号：R285．5文献标志码：A文章编号：1004—745X(2011)11—1784—02【摘要】目的观察清甲汤对自身免疫性甲状腺炎的治疗作用。方法采用高碘和甲状腺球蛋白多次免疫注射法制备大鼠实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)动物模型，大鼠随机分为正常组、对照组和治疗组。治疗组给予清甲汤(剂量lmL／100g)：实验结束后对

2、大鼠甲状腺组织做病理学检查，留取血清做甲状腺球蛋白抗体(TGAb)和甲状腺过氧化酶抗体(TPOAb)的测定。结果清甲汤给药的治疗组大鼠表现为甲状腺淋巴细胞浸润程度明显较对照组轻．有明显的病理学变化的改善；血清中TGAb和TPOAb水平明显低于对照组。结论清甲汤对自身免疫性甲状腺炎有明显的治疗作用。【关键词】清甲汤实验性自身免疫性甲状腺炎甲状腺蛋白抗体甲状腺过氧化酶抗体自身免疫性甲状腺炎是器官特异性自身免疫性疾病，甲状4周开始灌胃给清甲汤，按每100g体质量1mL容积给药。每日腺组织存在特有的自身抗原成分．刺激机体免疫系统生成自身1次，从第4

3、周持续到第10周。对照组给予生理盐水代替清甲特异性淋巴细胞和自身抗体．引起甲状腺组织的免疫性损伤和汤，用法同治疗组。炎症反应。甲状腺自身抗体包括甲状腺球蛋白抗体(TGAb)和甲1．5标本采集与检测(1)组织病理学观察：甲状腺组织用4％状腺过氧化酶抗体(TPOAb)．在自身免疫性甲状腺炎的发病中的甲醛固定，常规石蜡制片，苏木素伊红(HE)染色，20倍普通起重要作用，是检测甲状腺自身免疫性疾病的特异性指标，也是光镜下观察病理变化。(2)TGAb和TPOAb测定：取冻存的大鼠诊断和鉴别无症状亚临床桥本甲状腺炎的一个重要指标。本实血清。常温下解冻．

4、采用放射免疫分析法检测血清TGAb、验采用高碘和甲状腺球蛋白制备了实验性自身免疫性甲状腺炎TPOAb，参照试剂盒说明操作。(EAT)动物模型，观察清甲汤在自身免疫性甲状腺炎上的作1．6统计学处理计量资料以(±S)表示，各组之间的比较用，为其临床使用的可行性提供参考。采用单因素方差分析：计数资料的多组间比较采用秩和检验。P<0．05为差异有统计学意义。1材料与方法1．1实验动物健康雌性wistar大鼠．周龄5～6周，体质量2结果2．1病理学观察光镜下可见，正常组大鼠甲状腺为淡红色，120—140g，购于军事医学科学院动物实验中一tl,。细条状

5、．质地柔软：镜下甲状腺滤泡呈圆形或椭圆形，大小均匀1．2药物与试剂清甲汤：黄芪30g，茯苓25g，生地黄15g，A一致，上皮细胞呈低柱状，滤泡腔内充满淡红色胶质，分布均匀，芍10g，玄参10g，麦冬10g，五味子10g，党参20g，牡丹皮15g，末见炎细胞浸润。对照组大鼠甲状腺颜色浅淡、苍白，质地较硬，丹参10g，栀子10g，黄芩10g，香附10g，陈皮10g，柴胡10g，夏可见不同程度充血：镜下甲状腺组织均可见甲状腺滤泡结构中一草15g，当归20g，白术15g，法半夏15g，生龙骨30g，生牡蛎重度破坏，明显的炎细胞浸润和炎症反应(主要为

6、淋巴细胞)。治30g，酸枣15g，女贞子10g，甘草5g。上药煎药液制成100％疗组大鼠甲状腺组织与正常组大鼠在大体上无明显区别，质地(含生药1g／mL)口服液。高碘水(含碘化钠500mg／L)；DAB显色较柔软，少数可见轻度充血：镜下甲状腺组织炎细胞浸润较对照剂购于Sigma公司；牛甲状腺球蛋白，购于上海硕光电子科技有组明显减轻限公司；甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、甲状腺过氧化酶抗体2．2各组TGAb及TPOAb水平(以抗体结合率)比较见表l。(TPOAb)试剂盒，购于北京东雅生物技术有限公司。对照组大鼠血清TGAb、TPOAb水平均明显

7、高于正常组(尸<0．01)；l-3模型制备参考文献『1]报道的方法，采用高碘和甲状腺而与对照组相比．清甲汤能明显减少血清TGAb和TPOAb的生球蛋白诱发EAT。大鼠饮高碘水．日饮用量3mL，于实验开始接受足垫部皮下注射完全弗氏佐剂乳化的牛甲状腺球蛋白(1OO~g／袁1各组小鼠血清TGAb和TPOAb水平比较(％，Yc+_s)100g体质量，每周1次，作为初次免疫，第2、3、4周同剂量加强免疫各1次。第10周结束实验，大鼠摘眼球取血(3mL)，分离血清(一80。C冻存)，并摘取甲状腺组织备检测。1．4分组与给药实验动物随机分为正常组、对照组

8、和治疗组．每组有效检测与活杀取材的大鼠均为20只。正常组：饮实验与对照组比较，P<0．05；与正常组比较，AP<0．O1。窒自来水，正常饮食对照组和治疗组为EAT，治疗组大鼠于第