中药甲宁对自身免疫性甲状腺炎治疗作用的实验研究.doc

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1、中药甲宁对自身免疫性甲状腺炎治疗作用的实验研究【摘要】目的研究中药甲宁对自身免疫性甲状腺炎治疗作用。方法用0・05%碘化钠和福氏佐剂抗原乳剂进行造模，2周后加强免疫，以后每周加强免疫1次，至第6周结束[1-3]o正常对照组不做任何处理。各药物组即①~④组免疫后第3周开始灌胃给药,1次/d,均按每100g体质量1ml容积给药，⑤、⑥组大鼠给与等容生理盐水。第10周结束实验。取血(3ml),分离血清冻存(・80°C),测定甲状腺球蛋白抗体(tgab),甲状腺微粒体抗体(tpoab)o测量的甲状腺的重

2、量指数。甲状腺组织进行病理检查。结果组织学示雷公藤组及甲宁大、屮、小剂量组甲状腺病变程度均较模型组轻,差异冇统计学意义(P【关键词】中药甲宁;雷公藤;自身免疫;甲状腺炎1材料1.1动物sd大鼠，体重180^220g,雌雄各半。河北医科大学实验动物屮心提供，合格证号:dk0504-0001o1.2药品与试剂甲宁，中药汤剂，主要冇三棱、莪术、柴胡、五味子、炮甲株、何首乌、夏枯草、野菊花、女贞子等煎制而成，由河北省中医药硏究院提供，药液浓度每毫升含生药量2.4g,猪甲状腺球蛋白(porcinethyr

3、oglobulin,ptg,购自sigma公司)；完全福氏佐剂由福源生物制造；雷公藤片由三九企业集团三九黄石制药厂生产，批号:041007,为雷公藤提取物,每片含雷公藤甲素33Ug,用生理盐水研磨制成每毫升含雷公藤甲素1・5Ug的溶液。tg.tpo抗体放射免疫试剂盒由北京福瑞生物工程公司提供,批号:20051001o1.3仪器丫放射免疫计数器，西安262厂生产，型号:fj-2008po1.4完全福氏佐剂及不完全福氏佐剂抗原乳剂的制备将ptg用生理盐水配制成0・1%浓度的溶液，再将其与佐剂按?1:

4、l?(v/v)混匀，研制成油包水乳剂。每毫升乳剂屮含0.5mgptgo2方法2.1实验分组①中宁大剂量组(24g/kg);②甲宁中剂量组(12g/kg);③甲宁小剂量组(6g/kg);@雷公藤组(15P"kg);⑤模型组;⑥正常对照组，每组10只。2.2造模与给药①〜⑤组大鼠每天予以饮用0.05%碘化钠，实验第15天后，于背部多点皮下注射完全福氏佐剂抗原乳剂0.2ml(含ptglOOUg)进行初次免疫，2周后以不完全福氏佐剂抗原乳剂0.2ml加强免疫，以后每周加强免疫［次，至第6周结束［1-3］

5、o正常对照组不做任何处理。各药物组即①~④组免疫后第3周开始灌胃给药，1次/d,均按每100g体质量lml容积给药，⑤、⑥组大鼠给予等容生理盐水。第10周结束实验。摘眼球取血(3ml),分离血清冻存(・80°C),处死动物，取双侧甲状腺组织，称重并计算每100g大鼠体质量的甲状腺毫克数作为甲状腺的重量指数。之后，留取一侧甲状腺组织用10%中性甲醛固定，常规石蜡包埋切片，he染色。1.3甲状腺组织病理检查he染色的甲状腺组织切片，光学纤维镜下分别观察甲状腺实质及间质，包括滤泡大小、上皮形态、上皮及

6、滤泡间淋巴细胞浸润程度。并参考charveire的分类法⑶，将上皮细胞的淋巴细胞浸润分为以下几个等级：0级，0个炎细胞/张切片，记为0分；0级，0个炎细胞/张切片，记为1分；2级，1个炎细W10hpf（高倍视野），记为2分；3级，2个炎细胞/5hpf（高倍视野），记为3分；4级，1个炎细胞/2hpf（高倍视野），记为1分；间质的淋巴细胞浸润程度卜）为0级，记为0分，（+）为1级，记为1分，（+）为2级，记为2分，（++）为3级，记为3分，（+++）为4级，记为4分，甲状腺淋巴细胞浸润程度二滤泡上

7、皮间淋巴细胞浸润程度+滤泡上皮间淋巴细胞浸润程度。1.4甲状腺球蛋白抗体（tgab）,甲状腺微粒体抗体（tpoab）的测定大鼠血清tg>tpo抗体采用放射免疫试剂盒，并按试剂盒检测步骤进行tgab、tpoab水平测定。tgab>tpoab水平以抗体结合率表示。3结果临床研究表明，中药能有效地提高机体免疫能力和非特异性抗炎能力,软化缩小肿大的甲状腺组织及其结节，减轻甲状腺自身免疫反应，促进甲状腺功能的恢复，减少肾上腺皮质激素的临床用量，从而减轻激素的不良反应。