急、慢性乙型肝炎患者CD8^＋ T细胞PD-1分子表达的变化及临床意义.pdf

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1、第36卷5期宁夏医科大学学报2014年5月JournalofNingxiaMedicalUniversity·515·文章编号：1674—6309(2014)05—0515—04·论著·急、慢性乙型肝炎患者CD8T细胞PD一1分子表达的变化及临床意义吴菊意，姬广森，闫兰菊，杨玉贵，：蔚(河南省传染病医院肝病科，郑州450015：摘要：目的探讨急、慢性乙型肝炎患者病程中程序性死亡因子(PD一1)在~D8T细胞上的表达及临床意义。方法收集急性乙型肝炎(AHB)和慢性乙型肝炎(CHB)患者治疗前后的外周血样本，以正常体检者外周血样本作对照组(HE)，应用流式细胞术检测外周血CD8T淋巴

2、细胞表面PD一1分子的表达情况，荧光定量PCR检测血清HBVDNA载量，同时检测血清ALT水平。统计分析PD一1在急慢性?IBV感染过程中的表达变化，并分析其与HBVDNA载量及ALT的相关性。结果发病期的AHB、CHB患者外司血CD8T细胞的PD一1均明显高于HC组(P均<0．01)，且两组病人在治疗后PD—l表达与治疗前相比均降低(P均<0．05)。发病期AHB组PD一1的表达与ALT水平正相关(r=0．378，P=0．0395)，与HBVDN_t水平无相关性(r=0．0468，P=0．477)；发病期CHB组PD一1的表达与HBVDNA水平正相关(r=0．441，P=0．0

3、148)，与ALT水平无相关性(r=0．135，P=0．477)。结论急、慢性乙型肝炎患者外周血CD8T细胞上])D一1的表达水平均被上调，急性乙肝患者PD一1的上调与肝脏损伤相关，而慢性乙肝患者PD一1的上调与病毒的复制水平相关。关键词：乙型肝炎；CD8T细胞；程序性死亡因子一1中图分类号：R512．62文献标识码：A程序性死亡因子(programmeddeath，PD)一1康个体(HC组)35例。急、慢性乙肝患者均为未最初是从凋亡的小鼠T细胞杂交瘤2114．11克隆经过保肝或抗病毒治疗的初治病例，并排除合并出来的，含有288个氨基酸残基的I型跨膜蛋其他病毒性肝炎、肝癌、酒精性

4、肝病、药物性肝病、白⋯，由于其参与介导慢性病毒感染中CD8T寄生虫性肝病、肝豆状核变性及HIV感染，诊断细胞功能“耗竭”而被广泛研究j。乙型肝炎是符合2000年《病毒性肝炎防治方案》标准。由乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus，HBV)诱发机急、慢性乙肝患：在治疗前均留取外周血样本检体免疫应答造成的炎症反应，关于PD一1参与介测PD一1表达情况；急性乙肝患者经还原型谷胱导HBV感染慢性化的研究较多，但系统分析甘肽保肝治疗1～2周，慢性乙肝患者经还原型谷PD一1在急、慢性乙肝患者病程中中所扮演的不胱甘肽保肝治疗和拉米夫定抗病毒治疗2—4周，同角色却甚少。本文收集急性乙型肝炎

5、(acute急性乙肝患者陨i访3个月，慢性乙肝患者随访6hepatitisB，AHB)和慢性乙型肝炎(chronichepati—个月(慢性患者谴访期间均口服拉米夫定)，当患tisB，CHB)患者在发病期及肝功能恢复正常期的者ALT指标恢复正常(ALT<40)时，留取外周血外周血样本，分析PD一1的表达与临床血清学指样本检测PD一【表达情况。所有人组病例组及标的相关性，并比较治疗前后PD一1表达的差对照组均签署知情同意书。异，以此探讨PD一1在急、慢性乙型肝炎中表达1．2外周血CI)8T细胞表面PD一1的检测的临床意义。外周血以：素抗凝，用密度梯度离心法分离1资料和方法外周血单个

6、核细胞(PBMCs)，细胞计数后悬于1．1研究对象3％胎牛血清P3S中，调整细胞浓度为5×10／收集2012年1月至2013年1月我院收治的mL，取100~L加入CD3一Percp、CD8一FITC、急性乙型肝炎患者(AHB组)30例，慢性乙型肝PD一1一APC或同型对照流式抗体IgG1一APC炎患者(CHB组)30例，以及医院常规体检的健(均购自美国BI)公司)各1，混匀后4~C避光孵育30min，加1mL含3％胎牛血清的PBS洗涤两遍，加1％多聚甲醛3001xL固定后4~C避光保存，收稿日期：2013—11-27作者简介：吴菊意，男，主治医师，从事传染病诊治工作。尽快采用流式

7、细胞仪(FACSCalibur，美国BD公·516·宁夏医科大学学报36卷司)检测。范围内，且HBVDNA检测均阴性。ALT水平在1．3其它指标的检测AHB组和CHB组间差异无统计学意义(t=1．25，肝功能检测采用全自动生化分析仪P=0．267)，HBVDNA载量AHB组显著低于(AU5800，美国BeckmanCoulter公司)，试剂由英CHB组(t=5．21，P<0．01)。国朗道公司提供。HBV血清标志物采用酶联免表1急、慢性乙型肝炎患者临床资料疫吸附试验(ELISA)