重型乙型肝炎患者单核细胞HLADR分子表达及临床意义.doc

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1、重型乙型肝炎患者单核细胞HLADR分子表达及临床意义【摘要】目的：探讨重型乙型肝炎患者外周血单核细胞功能变化的特点及其意义。方法：应用流式细胞术(FCM)和酶联免疫吸附法对重型肝炎患者单核细胞HLADR分子的表达及外周血中白细胞介素10(IL10)的水平进行检测，并结合临床资料加以分析。结果：与正常对照组比较，慢性乙型肝炎、肝炎肝硬化、慢性重型肝炎患者外周血单核细胞HLADR的表达水平逐渐下降，尤其以慢性重型肝炎患者下降最为明显；而慢性重型肝炎患者外周血中TL10的水平则明显升高，差异均具有统计学意义(P<0.01)o相关分析表明，H

2、LADR的表达水平与凝血酶原活动度呈正相关(rs=0.61,P<0.01)o慢性重型肝炎患者死亡与存活组比较，前者HLADR水平明显降低；而IL10水平明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01)o结论：外周血单核细胞HLADR的表达水平与慢性重型肝炎患者病情严重程度以及预后密切相关，检测外周血单核细胞HLADR分子水平有助于评价匝型肝炎患者的免疫功能状态以及判断预后。【关键词】重型肝炎单核细胞人类白细胞抗原DR白细胞介素10研究表明肠源性内毒素血症所致的炎症反应在肝脏损伤机制中起重要作用。单核/巨噬细胞及其相关受体是机体识别并

3、启动炎症反应的始动因素，是导致炎症反应失控的关键环节之一[1]。但是目前有关重型肝炎患者单核细胞功能的变化及其机制研究报道较少。为此,我们应用流式细胞术(FCM)对重型肝炎患者单核细胞功能及酶联免疫吸附法对外周血血浆中TL10的水平进行检测，并结合临床资料分析，探讨重型乙型肝炎患者单核细胞功能变化的特点，为指导临床治疗重型肝炎及判断预后提供依据。1材料和方法1.1材料FITC鼠抗人CD14单克隆抗体(mAb)、PE抗人HLADRmAb及匹配的同型对照mAb购自Tmmunotech公司。人IL10检测试剂盒购自R&D公司。FACSca

4、libur流式细胞仪为美国BD公司产品。慢性重型乙型肝炎患者23例，其中男21例，女2例，平均年龄(46.2±13.1)岁；慢性乙型肝炎患者26例，其中男19例，女7例，平均年龄(32.3±&2)岁；肝炎肝硬化患者22例，其中男17例，女5例，平均年龄(43・2±9・6)岁。以上患者均来自我院2006-2007年的住院患者。正常对照20例来自本院健康体检者，其中男13例，女7例，平均年龄(29.6±6.8)岁。按2000年中华医学会传染病与寄生虫病学分会、肝病学分会联合修订的病毒性肝炎标准诊断［2］。排除标准：(1)近6个月内应用ci干扰素

5、、激素等药物治疗的患者；(2)合并其他肝炎标志物阳性者；(3)合并肝脏肿瘤者。1.2方法1.2.1单核细胞HMDR表达水平的检测取研究对象肝素抗凝外周血100uL,加入鼠抗人CD14及HLADR各20uL,室温下孵育30min,流式细胞术检测，CellQuest软件分析。1.2.2外周血血浆中IL10检测取研究对象肝素抗凝外周血，分离血浆，放置-70°C保存。儿10测定采用ELISA检测试剂盒，按试剂盒说明书操作。1.2.3统计学处理结果以x±s表示，两组间比较釆用两样本均数t检验，多组间比较应用方差分析并SNKq检验，应用SPSS11・0

6、统计软件进行分析，P<O.05为差异有统计学意义。2结果2.1外周血单核细胞HMDR的表达水平应用FCM对不同人群外周血中单核细胞HMDR的表达进行检测，结果显示：止常对照组外周血单核细胞HLADR的表达水平为(92.4±3.2)%,平均荧光密度为(107.8±6.3)%,而慢性乙型肝炎、肝炎肝硬化、慢性重型肝炎患者的表达水平逐渐下降，尤其以慢性重型肝炎患者下降最为明显，差异均具有统计学意义(P<0.01,表1)。表1不同人群外周血单核细胞HLADR表达水平比较(略)2.2外周血血浆中IL10水平的检测应用ELTSA对不同人群外

7、周血血浆中TL10的水平进行检测。结果显示：正常对照组(HC)IL10水平为(15.1±8.6)ng/L,慢性乙型肝炎(CHB)、肝炎肝硬化(LC)血浆中IL10的水平升高，分别为(32.6±9.4)和(25.4±11.8)ng/L(P<0.01);而慢性重型肝炎(SH)明显升高,为(63.7±28.5)ng/L,差异具有统计学意义(P<0.01,图1)。相关性23例慢性重型肝炎患者死亡或治疗无效10例，存活13例。两组患者外周血单核细胞HLADR表达水平分别为(23.1±8・7)%和(39.9±10.2)%;TL10的水平分别

8、为(87.3±31.6)和(45.5±26.1)ng/Lo两组比较，差异具有统计学意义(P<0.01,表2)。表2各组外周血HLADR与IL10水平比较(略)2.4单核细胞