机械牵张诱发肺泡Ⅱ型上皮细胞黏附相关的抗损伤机制研究.pdf

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1、山西医药杂志2015年1月第44卷第1期ShanxiMedJ，January2015，Vo1．44，No．1·3·论著机械牵张诱发肺泡Ⅱ型上皮细胞黏附相关的抗损伤机制研究刘晓阳任雁宏詹庆元【摘要】目的通过对大鼠原代肺泡Ⅱ型上皮(ATII)细胞进行机械牵张研究，探讨在牵张过程中黏附相关的抗损伤机制。方法采用活性荧光染色测定机械牵张所致ATⅡ细胞的死亡率，采用黏着斑染色相对定量法测定细胞的黏附水平，通过改变细胞外二价阳离子及黏附中和抗体调节细胞的黏附水平后，测定牵张后细胞死亡率。结果过度牵张导致细胞的死亡发生在牵张的早期(P<0．05)，且不随时间的延长而累积(P>O．0

2、5)，同时在牵张早期细胞黏着斑快速解聚，细胞表现出明显的回缩，黏附水平下降，推测牵张后细胞的黏附改变可能是细胞的抗损伤机制；通过调节细胞的黏附状态发现细胞黏附增强，牵张后细胞死亡率明显增加(P<0．01)，而一定程度的黏附降低，牵张后细胞的死亡率明显下降(P

3、ladhesionchangingLiuXiaoyang，RenYanhong，ZhanQingyuan．DepartmentofRespiratoryMedicine，BeijingJishuitanHospital，Beijing100035，China[Abstract]ObjectiveToinvestigatetheroleofprimaryratalveolartype11(ATI)cellsadhesioninavoi—dingmechanicalstretch—inducedcellinjury．MethodsTheisolatedATⅡceilswe

4、resubjectedtotonicstretchof37increaseinsurfacearea(△SA)biaxialstrain．Tonicstretch—inducedcelldeathwithincreasingtimewasde—tectedbytheviabilitystainingassay．Thecellmorphologieremodelingandleveloffocaladhesion(FA)werede—tectedbytheimmunofluorescenceassay．Inaddition，wechangedceilsadhesionb

5、yalteringbivalentcationlevelsintheculturemediumandapplyinganintegrinneutralizingantibody．Stretch—inducedeelldeathwithdifferentlevelofcelladhesionwasdetectedbytheviabilitystainingassay．ResultsTheviabilityassayshowedthatATⅡcelldeathwasnotincreasingwithtimeundertonicstretch(P>0．05)．Immunof

6、luorescenceassayshowedthatATⅡcellsexperiencedanexpansion-contraction—reexpansionresponsetotonicstretchandcellspartialFAdisassembledduringcontraction．Moreover，theviabilityassayofchangingcellsadhesionshowedthatfacilitatedadhesionaffini—typromotedcelldeathundertonicstretch(P<0．01)，while1ow

7、erlevelofadhesionprotectedthecellsfromstretch—inducedstressfailure(P