机械牵张预处理对过度牵张所致的肺泡上皮细胞损伤的影响及相关机制的研究

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1、万方数据中图分类号R614UDC61O硕士学位论文学校代码_l堕33密级公珏机械牵张预处理对过度牵张所致的肺泡上皮细胞损伤的影响及相关机制的研究Effectsofcyclicstretchpreconditioningonexcessivecyclicstretch—inducedalveolaranditsmechanism作者姓名：学科专业：研究方向：学院(系、所)：指导教师：黄涛临床医学麻醉学湘雅二医院高巨教授答辩委员会主席中南大学二0一四年五月万方数据学位论文原创性声明删本人声明，所呈交

2、的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名：耋)益日期：2f兰年工月生日学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的

3、全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。作者签名：盐导师签名扯日期：．卫旺月丛日万方数据机械牵张预处理对过度牵张所致的肺泡上皮细胞损伤的影响及相关机制的研究摘要第—部分过度机械牵张对肺泡上皮细胞凋亡及细胞骨架的影响目的：探讨过度机械牵张对肺泡上皮细胞凋亡及细胞骨架的影响，阐明其相关机制。方法：A549细胞株培养鉴定后分组，每组5份，施以相应的处理。实验分为空白对照组(C

4、组)和过度牵张组(S组)，S组：予以A549细胞20％的机械牵张2h、4h、6h和8h，分别记为S2组、S4组、S6组和S8组。收集细胞并测定下列指标：流式细胞仪检测细胞凋亡；荧光显微镜下观察F．actin改变；RT-PCR测定RhoA和RacmRNA表达。结果：与C组比较，S组随牵张时间延长凋亡率增加(尸<0．05)。F．actin染色结果显示：与C组比较，随着过度牵张时间的延长细胞骨架破坏加重，S8组尤为明显。RT-PCR检测结果显示：与C组比较，RacmRNA表达进行性降低(P<0．01)

5、；RhoAmRNA表达在6h、8h升高，6h时达峰值。结论：随着过度牵张时间的延长，细胞凋亡增加，细胞骨架破坏明显，其机制可能与上调RhoAmRNA表达、抑制RacmRNA表达密切相关。II万方数据第二部分机械牵张预处理对过度牵张所致肺泡E皮细胞损伤的影响及相关机制的研究目的：探讨机械牵张预处理对过度牵张所致肺泡上皮细胞凋亡及细胞骨架的影响，阐明其可能的相关机制。方法：A549细胞株培养鉴定后分组，每组5份，施以相应的处理。实验分为对照组(C组)、过度牵张6h组(S6组)和预牵张组(P—S组)，

6、S6组：予以上皮细胞20％的机械牵张6h，记为S6组；P．S组：预先给予5％机械牵张15min、30min、60min、120min之后将牵张幅度调整为20％牵张6h，记为P15．S6组、P30．S6组、P60．S6组和P120一S6组。所有组别均行流式细胞仪检测细胞凋亡；荧光显微镜下观察F．actin改变；RT-PCR测定RhoA和RacmRNA表达。结果：与S6组比较，预处理30、60、120min时P．S6组细胞凋亡率下降(P

7、色结果显示：与S6组比较，P．S6组肌丝重排、断裂减轻，周边肌动蛋白丝带清晰，以预牵张60min时更优。RT-PCR检测结果显示：与S6组比较，P—S6组RhoAmRNA表达均明显下降(户

8、号：R614UI万方数据Effectsofcyclicstretchpreconditioningonexcessivecyclicstretch—inducedalveolarepithelialcellanditsmechanism．AbstractPartITheeffectsofexcessivecyclicstretchonalveolarepithelialcellinjury0bjectives：Toinvestigatetheeffectsofexcessivecyclicstr