成年大鼠心房肌牵张激活钾通道的牵张敏感性和门控机制

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1、维普资讯http://www.cqvip.com·4·心脏杂志(ChinHeartJ)2008，20(1)·基础研究·成年大鼠心房肌牵张激活钾通道的牵张敏感性和门控机制刘旭霞，黄海霞，刘萍，钮伟真(首都医科大学生理学教研室，北京100069)摘要：目的探讨成年大鼠心房肌细胞牵张激活钾通道(stretch．activatedKselectivechannels，SAKCs)的电生理学特性，确定皮质细胞骨架在通道门控机制中的作用，对从通道水平阐明机械．电反馈具有重要的理论和实际意义。方法联合应用单通道膜片钳技术和压力钳技术，在急性分离的成年大鼠心房肌细胞上，采用细胞

2、贴附(cel1．aIta．ched)方式记录SAKCs的活动。结果实验所记录的通道为SAKCs，通道闪烁样开放，无整流特性。当细胞外液为高K液(140mmol／L)时，翻转电位为0mV。钳制膜电位+60mV时单通道的电导值为(59±5)ps，一60mV时为(5l±8)ps。通道约在负压刺激开始700～800ms内被快速激活，刺激解除后，通道快速在500ms内去激活。超过一30mmHg(1mmHg=0．133kPa)的刺激可使多个通道同时开放。实验中未观察到通道活动达到饱和现象。单通道电流幅度不受负压刺激的影响。随膜片钳电极内负压的增加，通道开放概率增大，呈刺激强

3、度依赖性。Cytocha．1asinB不改变SAKCs的电流幅度，但增加SAKCs的开放概率，增强SAKCs的背景活动和对机械刺激的敏感性。结论我们推测生理状态下细胞皮质肌动蛋白内衬于细胞膜，可能作为细胞膜的并联成分承受部分细胞应力，并使脂质膜的应力减少，从而使SAKCs不易被激活。关键词：膜片钳技术；压力钳技术；大鼠心房肌细胞；牵张激活钾离子通道(SAKCs)；细胞松弛素B中图分类号：R33l文献标识码：A文章编号：1009-7236(2008)Ol-004-06Mechanosensitivityandgatingmechanismofstretch-act

4、ivatedpotassiumchannelsinadultratatrialmyocytesLIUXu-xia，HUANGHai—xia，LIUP，NIUWei-Zhen(DepartmentofPhysiology，CapitalMedicalUniversity，Beijing100069，China)Abstract：AnTodiscusseleetrophysiologiealpropertiesofSAKCsandtodeterminetheefectofcorti-ealskeletoningatingmechanism0fSAKCsandtocl

5、arifyMEFmechanismatchannelleve1．METHoDSSingle··channelpatch·clamptechniqueandpressure··clamptechniqueweresimultaneouslyusedtoiden·tifvandcharacterizeSAKCsofisolatedadultratatrialmyocytesincel1．attachedmode．RESULTSThestretch．activatedchannelcurrentobservedwasKselectiveandnotrectifiedw

6、ithfliekerybursts．There-versalpotentialwas0mVwhentheatrialcellwasinahighK(140mmo1／L)bathsolutionandthemeanconductancewas(59±5)pSand(5l±8)pSat+6OmVand一6OmV，respectively．Thelatencyofehannel~responsetopressurestepsWas7oo～8ooms．Afterreleaseofsuction．thechannelsclosedwithin500ms．Stretchbe

7、yond一3OmmHgresultedinmultiplelevelsofchannelopening．TheSAKCsactivitydidnotreachsaturationbeforesealwasdestroyed．Thesingle．channelconductanceofSAKCswasinsensitivetomembranestretch．TheopenprobabilityofSAKCsinereasedinapressure-dependentman-ner．CytoehalasinBdidnotchangecurentamplitudeof

8、singleSAKCs，