抗盐酸克伦特罗单克隆抗体的固定及活性测定.pdf

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1、第10卷第2期生物加T过程Vo1．1ONo．22012年3月ChineseJournalofBioprocessEngineeringMar．2O12doi：10．3969／j．issn．1672—3678．2012．02．010抗盐酸克伦特罗单克隆抗体的固定及活性测定陈曦，曹慧，徐斐，于劲松(上海理工大学医疗器械与食品学院，上海200093)摘要：采用响应面法对抗盐酸克伦特罗抗体的固定化条件进行研究。结果表明：当固定温度4℃，固定方式振荡，抗体稀释倍数5．325×10，料液比0．948mL／颗，固定时间11．372h时，固定化抗

2、体活力最高，即HRP酶标IgG底物显色反应的OD可达1．4978。优化后的实验值与模型预测值(1．5013)基本相符。关键词：抗体；抗盐酸克仑特罗；固定化；优化；响应面中图分类号：TS207．3文献标志码：A文章编号：1672—3678(2012)02—0045—05Immobilizationanddeterminationofactivityformonoclonalantibodyanti-clenbuterolCHENXi，CAOHui，XUFei，YUJinsong(SchoolofMedicalInstrumentan

3、dFoodEngineering，UniversityofShanghaifi)rScienceandTechnology，Shanghai200093，China)Abstract：Theimmobilizationconditionsofthemonoclonalantibodyanti—clenbuterolwereoptimizedbyre。sponsesurfacemethodology．Theresultsshowedthattheimmobilizedtemperaturewas4℃．theimmobi—lizedw

4、aywasusedforoscillation，thestationaryphasewaspH9．6carbonatebuffer，antibodydilutionratiowas1：532500，theratioofsolidtoliquidwas0．948mLperstars，andthefixedtimewas11．372h．Undersuchconditions。theTMBsubstrateterminationreactionODagainstenzymelabeledan—tibodycouldreach1．4978

5、．Theobtainedvalueofoptimizedimmobilizationwasingoodagreementwiththepredictedvalueof1．5013．Keywords：antibody；anti．clenbuterol；immobilization；optimization；responsesurfacemethodology盐酸克伦特罗(clenbuterol，CL)又名“瘦肉合性食物中毒。精”_lJ，属一兴奋剂类激素J，临床可作为支气管我国已将HPLC法作为检测CL残留的半确证扩张剂用于防治哮喘性

6、慢性支气管炎及肺气肿等性方法，并将GC—MS法定为检测CL的确证性方呼吸系统疾病所致的支气管痉挛。研究发现，若法一。但以上方法检测过程繁琐、难以操作，不剂量加大至治疗剂量的5～10倍，且长期使用，有降能实现现场检测。免疫传感器作为一种生物传感低家畜脂肪、提高瘦肉率、促进家畜生长、改善肉质器，是将高灵敏的传感器技术与特异性免疫反应相的效果，因此在畜牧业上称其为生长促进剂。。结合的一种新方法，主要用于检测和监控抗原抗体人类在食用有CL残留的动物性产品后，会产生综之间的反应。该传感器检测限低、准确度高、可在收稿日期：2011—08—08

7、基金项目：国家自然科学基金资助项目(31】01283)；上海市研究生创新基金资助项目(JWCXSLI102)；上海市科委重点资助项目(10391901500)作者简介：陈曦(1987一)，女，辽宁沈阳人，硕士研究生，研究方向：食品安全与牛物技术；徐斐(联系人)，教授，E-mail：xufei．first@263．net生物加工过程第10卷短时间内完成检测，且传感器体积小、成本低，便于2结果与讨论携带和实现现场检测。固定化抗体柱是免疫传感器核心生物敏感元2．1抗盐酸克伦特罗抗体固定化条件的优化件，抗体固定化程度对提升整个生物传感器的

8、灵敏2．1．1抗体稀释倍数对抗体固定化效果的影响度起到重要作用。笔者采用响应面分析法对CL抗抗体浓度对于抗体的固定化效果有显著影响，体固定化条件进行优化1，以期为cL的检测提供在固定化温度为4℃，固定方式为振荡，料液比为新的方法。1mL／颗，固定1