抗体法SPRI法测定蔗汁葡聚糖含量的差异研究.pdf

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1、甘蔗糖业2009年第5期SugarcaneandCanesugar2009年10月抗体法SPRI法测定蔗汁葡聚糖含量的差异研究議議議周文红刘慧霞吴飒丽曹绍俊刘曼萍（广西大学轻工与食品工程学院，南宁530004）摘要为选择比较准确、方便和经济的测定蔗汁葡聚糖方法,对抗体法和SPRI法测定蔗汁葡聚糖含量的结果进行比较,得到了2种方法的数学关联式。初压汁：Y=3.2517x+28.824；末压汁：Y=1.3024X-6.9447；混合汁：Y=0.618X+129.93；清汁：Y=2.4072X+83.859；滤清汁：Y=1

2、.4656X+186.01；糖浆：Y=2.0582X+155.35。所得到的2种测定方法的关联方程表明：SPRI法受蔗汁中各种因素的干扰使得测定结果虚高。利用抗体法测定的准确性，且SPRI法和抗体法存在着一定的关联性，通过它们的关联式换算可望得到较真实的葡聚糖含量。关键词葡聚糖；抗体法；SPRI法；甘蔗汁[9]是快速扫描检测法（简称SPRI法，下同），它0前言具有耗时少、操作简单、不需要特殊仪器和设备等优点，更适合于甘蔗和蔗汁的常规检验，也有测定和研究制糖工艺过程葡聚糖的变化规律个别糖厂采用，但此种方法受蔗汁成分的影

3、响较有十分重要的现实意义。制糖工业中的葡聚糖由大，难以得到准确的葡聚糖含量数值。鉴于抗体肠膜明串珠菌（Leuconostocmesenteroides）发法和SPRI法各有利弊，有必要专门研究两种测定酵产生，从糖汁到成品糖的整个制糖工艺过程都方法在糖厂生产实际应用中的数据差异和影响测[1]存在着葡聚糖所带来的麻烦，如糖液粘度增加、定的有关因素，为测定葡聚糖排除影响因素的干糖分损失、过滤困难、晶体生长变形和使旋光测扰提供有价值的参考数据。本课题采用抗体法和定结果偏高等，直接影响到糖产品的产量和质量。SPRI法来检测亚硫

4、酸法蔗汁中的葡聚糖含量，得有关专家对葡聚糖的测定已经开展了广泛的研究到２种测定方法的对应数据并建立关联式，比较、[2]，他们多是把注意力集中在对葡聚糖的定量分确定SPRI法与抗体法的数据差异，为应用SPRI析上，到目前为止，葡聚糖的检测还没有准确且法准确测定不同糖汁的葡聚糖提供依据。[3～7]经济可行的测定方法。因此，寻找一种准确、快速的测定葡聚糖的方法尤为重要。近年来国外1材料与方法[8]很多糖厂都在使用抗体法测定葡聚糖的含量，此法具有操作简单，灵敏度高，针对性强，不需1.1材料要特殊的仪器和设备等优点，但由于所需

5、要的抗原料来源：蔗汁采自广西某制糖有限公司。体相对昂贵，在国内还极少使用抗体法，更没有主要仪器设备：葡聚糖检测仪（MCA浊度计）糖厂使用抗体法测定葡聚糖的报道。目前国内测（美国）；紫外可见分光光度计（德国）；电子天[8]定葡聚糖的标准方法是改进的罗伯特—铜法，平（北京赛多利斯天平仪器厂）；台式离心机（上此法操作烦琐，耗时长。除了抗体法和改进的罗海市安停科学仪器厂）；数字式阿贝折射仪（上海伯特—铜法外，测定葡聚糖较有应用意义的方法物理光学仪器厂）；刻度试管、容量瓶、移液管、*作者简介：周文红（1969－），硕士，讲师，

6、主要从事食品生化方面教学与科研工作。E-mail:zwh0103@gxu.edu.cn議議通信作者：刘慧霞，教授，E-mail:sugarliu@gxu.cdu.cn-40-周文红等：抗体法SPRI法测定蔗汁葡聚糖含量的差异研究漏斗和滤纸等。（1）仪器校正：按照仪器说明书将仪器调整主要试剂：随葡聚糖检测仪的各种药品（米为标准状态。兰MCA缓冲剂粉、T2000标准葡聚糖样品、米兰（2）在测试管中加入2.0mL抗体溶液，放MCA抗体、米兰测试管等）；无水乙醇、硅藻土和入浊度仪中测定，得出读数N0，如果空白试验读三氯乙酸等

7、。数大于80NTU（浊度值），将该批抗体溶液过滤直1.2实验方法至读数小于80NTU；用500mg/L的葡聚糖标准溶1.2.1SPRI快速扫描检测法液对抗体进行标定，测定过程和测定样品一致，其原理是根据葡聚糖能够与无水乙醇在50％得出N1；计算△NTU（样品浊度值-空白浊度值）的酒度下完全作用，葡聚糖在乙醇中不溶解而产＝N1-N0，算出转换系数CF（转换系统）＝500/生浊度，再用分光光度计测定浊度，得到吸光度△NTU。值，根据标准曲线方程得到葡聚糖的含量。由于（3）将样品在测试前用干净的5mL注射器多糖的类别不同，

8、其沉淀状况也有区别，SPRI法和0.45um的筒式过滤器过滤。使用50％酒度的酒精可保证葡聚糖沉淀完全，同（4）在测试管中加入2.0mL抗体溶液，读时又避免在高酒度下增加其它多糖沉淀的可能取空白值N0；用固定体积的移液管吸取10uL已性，减少了测定的干扰。过滤好的样品溶液加入其中，均匀混合，不要产测定过程：生气泡，盖上测定仪的盖子，同时启动计时