抗Fc受体γ链单克隆抗体的研制及生物学特性鉴定.pdf

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1、ISSN1007—8738细胞与分子免疫学杂志(ChinJCellMolInmmno1)2011，27(7773·论著·文章编号：1007—8738(2011)07—0773—04抗Fc受体链单克隆抗体的研制及生物学特性鉴定钱琨，金文杰，邵红霞，吴建明，秦爱建(扬州大学兽医学院江苏省动物预防医学重点实验室，江苏扬州225009；美国阿拉巴马州立大学，伯明翰35294)Developmentandcharacterizationof胞术(FCM)检测鉴定抗体的特性及抗原识别位点。结果：通过细胞融合和亚克隆，共筛选出3株能稳定分泌抗体并且反monoclonalantibodyaga

2、insthuman应性好的杂交瘤细胞株5B6、7D3和8D4。其中7D3抗体反FcRchain应性最强，2．5mL与体内体外的链都能特异性反应。结论：获得了抗Fc受体链特异性的mAb，为进一步研究FcQIANKun，删Wen-fie，SHAOHong—xia，Jian—受体链在相关疾病发生发展过程中所发挥的作用提供了良ming2好的研究手段。，QINAi-jianKeyLab．ofJiangsuPreventiveVeterinaryMedicine，Yangzhou[关键词]Fc受体^y链；单克隆抗体；生物学鉴定University，Yangzhou255009，China；

3、UniversityofAlabamaat[中图分类号]R392．1l[文献标识码]ABirmingham，Birmingham35294，USAFc受体^y链属于‘特异性信号分子家族中的一[Abstract]AIM：Thecurrentstudywasaimedtogen·员，Ktister等首先克隆表达了链基因，并与考链eratemousemonoclonalantibodies(mAbs)specificforFc进行了比较，得知链由5个外显子86个氨基酸组receptorcommonychain(FcRy)，whichservesacritical成。人的^y链与专链的

4、同源性达到58％，在他们的signalingmoleculefornumeroushumanimmunereceptors胞内尾部都含有免疫受体酪氨酸激活区域(ITAM)。thatplayessentialrolesinhumanimmuneresponses．ITAM区域的氨基酸序列YxxL／I—x7一YxxL／I是对细胞METHODS：TwOBALB／cmicewereimmunizedwiththesynthesizedpolypeptidescontaining19residuesatthecar-信号传导非常重要的功能性区域，交联细胞表面的boxylterminuso

5、fhumanFcRYchain．ThespleencellsfrOm受体，可以激活受体使ITAM中的酪氨酸磷酸化，theimmunizedmicewerefusedwithmyelomaSD2／0cells．Syk酶和磷酸化的ITAM结合从而使细胞信号继续传ELISAwasusedtoscreenmAbsandthepositiveclones递下去J，因此Fc受体^y链在多种细胞的信号传导wereselectedforfurthercharacterizationwithWesternblot中发挥重要的作用。andflowcytometryassays．RESULTS：Af

6、terscreen，thereFc^y链不仅具有信号传导作用，体内和体外研究hybridomacellineswhichsecretedmAbsspecificallyrecog-得知受体FcRI和Fc~／RIIIA在细胞表面还表达需要nizedtheFcRychainwereobtainedandnamedas5B6，链的存在，而Fc~RI与FmRI的表达不依赖于7D3and8194．The7D3mAbhadthebestqualityandit链J。此外，通过对Fc链缺失小鼠的研究发现，couldrecognizetheFcRychaininvivoand／nvitrowi

7、th2．5链还参与FcI的表达和生物功能反应。在人的Ug／mL．CONCLUSION：WehavegeneratedtheFcR~．-spe-自然杀伤细胞中，聚集Fc受体能够诱导Fc^y链酪cificmAbs，whichmayserveasavaluabletoolinthefunc-氨酸磷酸化，从而引发Fe受体诱导的信号传导J。tionalstudiesofFcR-yassociatedimmunereceptors．[Keywords]Fcreceptorychain；monoclona