抗Fc受体γ链单克隆抗体的研制及生物学特性鉴定.pdf

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1、ISSN1007—8738细胞与分子免疫学杂志(ChinJCellMolInmmno1)2011,27(7773·论著·文章编号:1007—8738(2011)07—0773—04抗Fc受体链单克隆抗体的研制及生物学特性鉴定钱琨,金文杰,邵红霞,吴建明,秦爱建(扬州大学兽医学院江苏省动物预防医学重点实验室,江苏扬州225009;美国阿拉巴马州立大学,伯明翰35294)Developmentandcharacterizationof胞术(FCM)检测鉴定抗体的特性及抗原识别位点。结果:通过细胞融合和亚克隆,共筛选出3株能稳定分泌抗体并且反monoclonalantibodyaga

2、insthuman应性好的杂交瘤细胞株5B6、7D3和8D4。其中7D3抗体反FcRchain应性最强,2.5mL与体内体外的链都能特异性反应。结论:获得了抗Fc受体链特异性的mAb,为进一步研究FcQIANKun,删Wen-fie,SHAOHong—xia,Jian—受体链在相关疾病发生发展过程中所发挥的作用提供了良ming2好的研究手段。,QINAi-jianKeyLab.ofJiangsuPreventiveVeterinaryMedicine,Yangzhou[关键词]Fc受体^y链;单克隆抗体;生物学鉴定University,Yangzhou255009,China;

3、UniversityofAlabamaat[中图分类号]R392.1l[文献标识码]ABirmingham,Birmingham35294,USAFc受体^y链属于‘特异性信号分子家族中的一[Abstract]AIM:Thecurrentstudywasaimedtogen·员,Ktister等首先克隆表达了链基因,并与考链eratemousemonoclonalantibodies(mAbs)specificforFc进行了比较,得知链由5个外显子86个氨基酸组receptorcommonychain(FcRy),whichservesacritical成。人的^y链与专链的

4、同源性达到58%,在他们的signalingmoleculefornumeroushumanimmunereceptors胞内尾部都含有免疫受体酪氨酸激活区域(ITAM)。thatplayessentialrolesinhumanimmuneresponses.ITAM区域的氨基酸序列YxxL/I—x7一YxxL/I是对细胞METHODS:TwOBALB/cmicewereimmunizedwiththesynthesizedpolypeptidescontaining19residuesatthecar-信号传导非常重要的功能性区域,交联细胞表面的boxylterminuso

5、fhumanFcRYchain.ThespleencellsfrOm受体,可以激活受体使ITAM中的酪氨酸磷酸化,theimmunizedmicewerefusedwithmyelomaSD2/0cells.Syk酶和磷酸化的ITAM结合从而使细胞信号继续传ELISAwasusedtoscreenmAbsandthepositiveclones递下去J,因此Fc受体^y链在多种细胞的信号传导wereselectedforfurthercharacterizationwithWesternblot中发挥重要的作用。andflowcytometryassays.RESULTS:Af

6、terscreen,thereFc^y链不仅具有信号传导作用,体内和体外研究hybridomacellineswhichsecretedmAbsspecificallyrecog-得知受体FcRI和Fc~/RIIIA在细胞表面还表达需要nizedtheFcRychainwereobtainedandnamedas5B6,链的存在,而Fc~RI与FmRI的表达不依赖于7D3and8194.The7D3mAbhadthebestqualityandit链J。此外,通过对Fc链缺失小鼠的研究发现,couldrecognizetheFcRychaininvivoand/nvitrowi

7、th2.5链还参与FcI的表达和生物功能反应。在人的Ug/mL.CONCLUSION:WehavegeneratedtheFcR~.-spe-自然杀伤细胞中,聚集Fc受体能够诱导Fc^y链酪cificmAbs,whichmayserveasavaluabletoolinthefunc-氨酸磷酸化,从而引发Fe受体诱导的信号传导J。tionalstudiesofFcR-yassociatedimmunereceptors.[Keywords]Fcreceptorychain;monoclona

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