肝细胞肿瘤患者癌组织中HBx基因的检测.pdf

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1、·。疾病搜制杂志999年3月第3卷第期33HBx肝细胞肿瘤患者癌组织中基因的检测```,周青刘虎汪渊李旭刘建辉x[摘要1目的通过检测肝细胞肿瘤(HCC)患者癌组织中HB基因探讨乙型肝炎病毒(HBV)在。x,HCC中的重要性方法根据HB基因DNA序列设计引物采用特异性聚合酶链式反应(PCR),对31例病理确诊并经手术切除后的HCC患者癌组织进行了检测同时采用PCR方法检测了同一。x患者血清HBVDNA结果PCR显示31例HCC患者癌组织中HB基因和血清中HBVDNA..。x的阳性率分别为74%(2

2、4/31)和323%(103/1)结论HB基因片段广泛存在于HCC患者癌。组织中并且在癌细胞中可能存在整合;;;HBx【关镇词】乙型肝炎病毒(HBV)肝细胞肿癌(HCC)聚合酶链式反应..;一一一I中图分类号1Rs732R7ss709[文献标识码】Al文章编号110086013(1999)01003502eoun,uu,anan,DetetionoftheHBxgeneinthetissueofHCCPatientsZhQigLiHWgLiuY.u,ua,uaooecuroaneaenoces,

3、nuXLiJihiLbartry凡orllaBiledDPrtmtBihmit即Ah`of舒of亡ca,vers,亡,na材dilUiiyt刀介1230032hCiAtrtbectiveInordertoexplorethesignifieantrolesthathepatitisBvirus(HBV)plays[bsacloj·neaoeeuarearea,exeneessueoaens5exaneihptlllinom(HCC)thHBginthtifHCCptit1mideeorneseu

4、eeeeee,`seeeoeraseeanreaeonMethsAdigtothDNAqnofthHBxgn3pifiplymhitido5aeexaeeaens`ssuesseuorsaveeensurcaexese(PCR)1pplidtominth31ptittiwhotmhbgillyid.aaooeaanse,aeaeeeserueosvendpthlgillydigodndtoxminthHBVDNAinthmResultsThpiti.raesoxeneneaes`ssuesane

5、eseruaretfHBgith31ptinttidthHBVDNAinthm774%(24/31)..areseeveueeeessnessuesa-nd323%(10/31)ptilyClsionsThHBxgnxitithtiofHCCpcon..tientsinawiderangeTheremaybeanintegrationoftheHBxgeneinthegenomeoflivereellseywordsepatitisBvirus;hepatoeellulareareinoma;p

6、olymeraseehaineraetion(PCR);HBxIKlh,、、、(HBV);TaqDNAdNTPgC12中国是乙型肝炎病毒感染的高发地区有限公司合成聚合酶M蛋、,而肝细胞肿瘤(HCC)患者与HBV的长期感染有白酶KPCR缓冲液等购自华美生物工程公司其。他试剂均为国产分析纯;Hema4关有关资料表明HBV在人体肝细胞内存在整80基因扩增仪为珠。。x合l[]特别是HBv四个基因中的基因具有反式激海黑马医学仪器有限公司产品.,。x12活作用与HCC的发生密切相关闭根据HB基因标本选择31

7、例肝癌组织取自安徽医科大学,,DNA序列设计引物采用聚合酶链式反应(PCR)测附属医院外科HCC患者手术标本并经病理证实。x定了31例HCC患者手术后癌组织中HB基因片以及患者术前血清标本.,13DNA2段同时采用PCR方法检测了同一患者血清中肝癌墓因组的提取取肝癌组织0,·-。拌g500拌1DNA(100mmolL一`NaHBVDNA加入提取液.,·`,,.1mmo一0550mmoCIlLEDTA%SDSll材料与方法.`一,,一rispH80)4℃50LTHCI冰浴中匀浆后加入.29·一`,

8、6h,11主要试剂和仪器引物由上海生工生物工程川L蛋白酶K置37℃消化酚/氯仿抽,,1Z提乙醇沉淀基因组DNA干燥后溶于0川dHO,,Z2n【基金项目】安徽省教委自然科学研究重点课题(JL96一中经60m比色计算DNA含量用dHO稀释077);n·一`。至250g”l备用安徽省自然科学研究基金资助课题(9741006).14血清nBvDNA的提取待检血清125拌l加、’【作者单位】安徽医科大学分子生物学实验室生物化学教·-o一`a,入125拼1HBVDNA提取液(200mmlLN研室安徽合肥23

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