肝癌相关的单克隆抗体的制备及其抗原表位分析.pdf

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1、78{)SSN1007二曼Z38-q]lJig.lr崆忠(ChinJ【ellMolIlllnHrlOI201I,27【7)·论著·文章编号:1007—8738(2011)07—0780—04肝癌相关的单克隆抗体的制备及其抗原表位分析杨秉芬,刘蓉,刘莹!,杨金菊,柳晓兰,高建恩,孙启鸿(解放:第309医院全军结孩病研究所结核病研究室.北京10009l;军事医学科学院放射tj辐射、研究所It康h履组研究fIl、蛋门质纽围家重点实验,rI匕京102206)Preparedthemonoclonalantib

2、odyasso·[摘要]目的:制备煽l卡【i火的电隆抗体(mAh)⋯1II下痫的诊断。方法:川断转移盯癌胞系HCCIM一6细胞免疫ciatedwithhepatocellularcarcinomaBMB/小鼠.取小睥细胞jSp2/0融合建杂交瘤细胞andanalyzeditsepitope系通越ELISA法筛选IICCIM一6细胞篮门的特片:mAb,}手j免疫组化染法筛对肝癌组织m一昔夏高的mAb,}}j免YAACRlgnt。LlljRongzLIUYing。YANGJin—疫荧方法定同Hrh眦系l1

3、1的表达,最通过筛:IJUXiao—lau,GAOJian—eH。选Uni—ZAPXR人Hf卸1胞e1)NA表达文旰初步惨nAb"ll、圳,£,,SUNQi—hong1)ivIsionIJfResem’ch.InstituteofTuberculosis.No.309Hospital的抗及其表结果:缱●r28株杂交瘤细胞株,f1Joi’PI.A.Beijing100091;StaKey1,aboratoryofProteomics,EIISA法秆l免疫组化染色法筛选f⋯T痛件丰较高的mA}】QcA06

4、2。通过人盯咆cDNA发i殳筛选仞惨定H』JBeijingProteomeResearehCenter,BeijingInstituteofRadiationmAbQGA062以别的抗原足纤维连接蛋门(1N),绛分析抗Medieal,Beijing102206,China原表付他于肽段YrvslVAIKGNQESPK结论:铁得j盯癌丰¨Abstract!AIM:Topreparethemonoclonalantibodies跫的mAhQGA062计搭定r{5l圳的抗原和表化,盱癌的associated

5、withhepatocellularcarcinoma(HCC)fordiagno—诊断雨IFN参与瑞转移的机制钟f究捉但了币爱的制剂sis.METHODS:3BALB/cmicewerejmmunizedwithhigh[关键词]肝痢;克隆抗体;丧分折metastasischaracteristicHCCcells(HCCLM一6).The[中图分类号]R392.11[文献标识码]Bsp!enocytesfrOmtheimmunizedmicewerefusedwithmu-finemyelorrl

6、aceilsI/Sp2/0)Thehybridomacelswere原发性肝癌是伞球第5位、巾国第2位最常见screenedbyELISAaftercoatingwiththetotalproteinand的癌症。根据罔际癌症研究中心估计,2000年全球theculturesupernatantofHCCLM一6cells.ThemAbswere月f癌发病数为564万人,其一1i约55%发牛{lJf,characterizedbyimmunohistochemicaIstainingintheHCC即

7、闭的肝癌患者为30.6人,死率高达98%,tissues.andbyindirectimm“nOfIuorescentstainingindiffer而儿有升的趋势。早期肝癌很难发现,·.出entcellines.Theantigenandepitoperecognizedbythe现症状,大多已到lr晚期由于肝癌标志物甲胎蛋白rnAbswereidentifiedbythescreeningpremadeUni—ZAP(AF、P)的应用,肝癌得以早期诊断获得根治性手术的humanlivercDNAe

8、xpressionlibrary.RESULTS:Twenty—机会,中【j1医院比较了1959~1978年和1979~1998eighthybridemacellssecretingmAbswereestablished.ORecloneofthehybridomas.QGA062,secretedspecific年期间住院的肝癌患者,其1()年的生存率已从6.0%mAbassociatedwithHCC.Theantigenrecognizedbyt

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