肝癌相关抗原KINECTIN的表达、纯化及其血清学分析

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1、肝癌相关抗原ⅪNEC邢N的表达、纯化及其血清学分析2005级硕上研究生论文肝癌相关抗原KiNECTlN的表达、纯化及其血清学分析摘要目的：检测人类动力素蛋白(kinectin)抗体在人肝细胞癌(HCC)血清及其它肿瘤病人、肝硬化病人、正常人血清中出现的频率，探讨其在HCC诊断应用方面的价值。方法：将本课题组构建的含kinectin基因片段的质粒，经基因工程表达后，用亲和层析柱分离纯化，获得融合蛋白MBP—kinectin。融合蛋白MBP—kinectin酶切后，获得非融合蛋白kinectin。使用Western-blot技术，比较kinectin和融

2、合蛋白MBP—kinectin二种抗原的免疫活性。用ELISA技术检测肝癌、肝硬化、及其它肿瘤病人血清中kinectin抗体的阳性率，并进行统计学分析。结果：(1)50例肝细胞癌患者中有kinectin抗体者29例，阳性率为58％，AFP诊断为阴性的16例肝细胞癌患者中有kinectin抗体者7例(43．8％)，提示血清kinectin抗体的检测对AFP阴性的HCC病例诊断有一定的弥补作用。(2)50例肝硬化中有13例kinectin抗体阳性，阳性率为26％；50例胃癌有9例kinectin抗体阳性，阳性率为18％；50例结肠癌有6例kinectin

3、抗体阳性，阳性率为12％；50例肺癌患者有8例阳性，阳性率为16％；50例正常人有4例阳性，阳性率为8％。(3)用kinectin诊断HCC的灵敏度58％、特异度84％、精确度80％、阳性预测值42％、阴性预测值91％、阳性似然比3．6及阴性似然比为O．5。在本实验中AFP诊断HCC的灵敏度为64．7％(22／34)。将二者联合后，其联合灵敏度为85．2％，可见联合诊断的灵敏度有明显提高肝癌相关抗原ⅪNEC兀N的表达、纯化及其血清学分析2005级硕上研究生论文结论：kinectin抗体的检测对HCC的诊断有～定的特异性，对AFP阴性的HCC的早期诊断

4、有一定的补充作用。运用AFP与kinectin抗体的联合检测，可提高HCC的早期诊断率。关键词：Kinectin，肿瘤相关抗原，血清学，肝癌细胞肝癌相关抗原ⅪNEC邢N的表达、纯化及其血清学分析2005级硕士研究生论文EXPRESSION，PURIFICATlONANDASSAYOFSERUMIMMUNOLOGYOFHEPATOCELLULARCARCINOMA．ASSOCIATEDANTIGENKINECTINABSTRACTObjective：1’oinVestigatetheutilizingValueofkinectinantibodyfor

5、HCCinclinicdiagnosis，thekinectinantibodyinseraofHCC，othertumor，hepaticcirrhosis，andhealthadultweredetectedMethods：TherecombinantVectorincludingkiIlectingenesegmentwasintroductedintoE．coliDH5Q．Thefusionprotein，MBP-l【inectin，wasobtainedbymeansoftheexpressionofgeneticengineeringan

6、dtheseparationofaffinitycolumn．Thenon—fusionprotein，kinectin，wasprocuredafterMBP-l【inectinwascuto任byenzyme．TheimmunocompetenceofkiIlectinproteinandthatofMBP—kinectinwerecomparedbymeansofW色stem-blottechnique．1【inectinantibodyofthepatient’ssemmofHCC，cirrhosisandothercancer，andsom

7、ehealthadultweredetectedbyEUSA．Theresultwasanalyzedstatistically．Result：(1)In50casesofHCC，theantibodiesagainstkinectinof29caseswaspositiVe(58％)，andin16casesoftheHCCwithAFPnegatiVe，theoneof7caseswaspositive(43．8％)．1(inectinantibodyhadcomplementforthediagnosisofHCCiIlpatientswith

8、劁即negatiVe．(2)In50casesoflivercirrhosis，theantibodiesa