呋喃它酮代谢物AMOZ单克隆抗体的制备与免疫学特性鉴定.pdf

《呋喃它酮代谢物AMOZ单克隆抗体的制备与免疫学特性鉴定.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、西北靡业学报2011，2O(6)：38—42ActaAgriculturaeBoreali～occidentalisSinica呋喃它酮代谢物AMOZ单克隆抗体的制备与免疫学特性鉴定范国英，张海棠，杨艳艳，邓瑞广，张改平(1．河南科技学院动物科学学院，河南新乡453003；2．河南省农业科学院免疫学重点实验室，郑州450002)摘要：用碳二亚胺(Dcc)一步法将对醛基苯甲酸衍生物CPAMOZ偶联于牛血清白蛋白、卵清蛋白上，合成免疫原cNPAM0Z_BSA、包被原cNPAM0rZ_OVA。用紫外线扫描、SDS-

2、PAGE进行人工抗原合成的鉴定；免疫Balb／c小鼠，用杂交瘤技术建立分泌NPAMOZmAb的细胞株；对NPAMOZmAb的效价、敏感性和特异性进行鉴定。结果表明，CPAMOZ—BSA人工抗原分子结合比为15：1；筛选出分泌NPAMOZmAb的敏感特异的杂交瘤细胞1株2D11一B4，间接ELISA测定细胞培养上清，效价达到1：(6．4×10)，腹水效价为1：(1．2×10)，对NPAMOZIC。为7．58,ug／L，与其他抗生素交叉反应率低。本试验获得了抗NPAMOZ高价、敏感、特异的mAb，可用于呋喃它酮代

3、谢物AM0z的残留检测。关键词：呋哺它酮代谢物AM0Z；衍生物CPAM0Z；NPAMOZ；单克隆抗体；免疫学特性中图分类号：$859．84文献标志码：A文章编号：1004—1389(2011)06—0038—05GenerationandImmunologicalTraitofMonoclonalAntibodyforFuraltadoneMetaboliteFANGuoying，ZHANGHaitang，YANGYanyan。，DENGRuiguang。andZHANGGaiping(1．Collegeof

4、AnimalScience，HenanInstituteofScienceandTechnology，XinxiangHenan453003，China；2．InstituteofBiologyandTechniqueScience，AgriculturalAcademyofHenanProvince，Zhengzhou450002，China)Abstract：ThecoatingantigenCPAMOZ—OVA，immunogenCPAMOZ—BSAofenzymemarkedsynthe—sizedw

5、ithAMOZwascoupledwithBSAandOVAbyDCC—method．UltravioletscanningandSDS_PAGEelectrophorosiswereusedtoidentifyAMOZartificialantigen．Balb／cmicewereimmunizedbyCPAM0Z—BSA，thehybridoma1inesthatsecreteNPAM0ZmAbwereestablishedbyusingmono—clonaIantibodyhybridomatechno

6、logy．Theimmunologiealtraitssuchastiter。sensitivityandspecifici—tvofthismAbwerecharacterized．TheresultsshowedthattheCOnjugationratioofNPAMOZtoBSAinNPAMOZartificialantigenwas15：1．Thetiterofsupernatanthybridomacelllinesof2D11-B4was1：(6．4×10)byindirectELISA．The

7、determinationofasciteseffectis1：(1．2×1O。)．IC5owas7．58t~g／L，cross—reactivitytoothercompoundsislow．TheexperimentgeneratedAMOZmAbwashigh—titer，sensitivityandspecificity．ThismAbcanbeusedtodetectAMOZresiduesinfood．Keywords：Furaltadonemetabolite(AMOZ)；Derivatives

8、CPAMOZ；NPAMOZ；Immunologicaltraits；Monoclona1antibody呋喃它酮是一种硝基呋喃类药物，具有非常好的抗菌作用，在临床上主要用于鸡白痢、鸡大肠收稿日期：2010-12-14修回日期：2011-04—22基金项目：“十一五”国家重大项目(2006BAK02A21)。第一作者：范国英，女，副教授，博士，主要从事动物中毒性及营养代谢性疾病研究。E—mail：fa