羊栖菜乙醇提取物的抗氧化活性.doc

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1、羊栖菜乙醇提取物的抗氧化活性　　摘要：用体积分数７０％的乙醇浸提羊栖菜得到粗提物，将粗提物溶于去离子水再依次用有机溶剂萃取，得到氯仿萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物和萃取后剩余物，测定粗提物和各萃取物的总多酚含量、维生素Ｃ和维生素Ｅ含量以及还原力。结果表明，正丁醇萃取物中的总多酚和维生素Ｅ含量较高，正丁醇萃取物和乙酸乙酯萃取物具有较强的还原力。　　关键词：羊栖菜；抗氧化活性；总多酚；ＤＰＰＨ・　　中图分类号：Ｑ９４９．２８＋８．５；Ｒ２８４．２文献标识码：Ａ文章编号：0439－８11422－4695-03

2、　　　　ＡｎｔｉｏｘｉｄａｎｔＡｃｔｉｖｉｔｉｅｓｉｎＶｉｔｒｏｏｆＥｔｈａｎｏｌＥｘｔｒａｃｔｆｒｏｍＳａｒｇａｓｓｕｍｆｕｓｉｆｏｒｍｅ　　　　ＹＥＨｏｎｇ１，ＺＨＯＵＣｈｕｎ－ｈｏｎｇ２，GAOBei-lei2，ＷＡＮＧＸｉａｏ－ｑｉｎｇ１，ＺＥＮＧＸｉａｏ－ｘｉｏｎｇ１，ＹＡＮＧＸｉａｏ－ｈｕａ１，ＲＥＮＤｅ－ｋａｎｇ１　　　　　　Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＣｒｕｄｅｅｘｔｒａｃｔｏｆＳａｒｇａｓｓｕｍｆｕｓｉｆｏｒｍｅｗａｓｏｂｔａｉｎｅｄｕｓｉｎｇ７０％ｅｔｈａｎｏｌａｓｅｘｔｒａｃｔｉｎｇｓｏｌｖｅｎｔ

3、，ｄｉｓｓｏｌｖｅｄｉｎｄｉｓｔｉｌｌｅｄｗａｔｅｒａｎｄｔｈｅｎｆｒａｃｔｉｏｎａｔｅｄｂｙｉｎｏｒｇａｎｉｃｓｏｌｕｔｉｏｎｉｎｃｌｕｄｉｎｇｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ，ｅｔｈｙｌａｃｅｔａｔｅ，ａｎｄｎ－ｂｕｔａｎｏｌｏｒｄｅｒｌｙ；FｏｕｒｆｒａｃｔｉｏｎｓｏｆＣｆ，ＥｔＯＡｃ，ｎ－ＢｕＯＨａｎｄａｑｕｅｏｕｓwereｃｏｌｌｅｃｔｅｄ．Ｔｈｅａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｉｅｓａｎｄｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｔｏｔａｌｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ，ｖｉｔａｍｉｎＣａｎｄＥｉｎＣＥａｎｄｔｈｅｆｏｕｒｆｒａｃｔｉ

4、ｏｎｓｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ．ＲｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｃｏｎｔｅｎｔsｏｆｔｏｔａｌｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓａｎｄｖｉｔａｍｉｎＥwereｈｉｇｈｅｒｉｎｎ－ＢｕＯＨｆｒａｃｔｉｏｎ；Wｈｉｌｅｎ－ＢｕＯＨｆｒａｃｔｉｏｎａｎｄＥｔＯＡｃｆｒａｃｔｉｏｎｅｘｈｉｂｉｔｅｄｈｉｇｈｅｒａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｙ．　　Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｓａｒｇａｓｓｕｍｆｕｓｉｆｏｒｍｅ；ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｙ；ｔｏｔａｌｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ；ＤＰＰＨ・　　　　羊栖菜属褐藻门马尾藻科，是

5、暖温带－亚热带性海藻，主要生长在太平洋北部，在我国广大海域都能生长。酚类化合物广泛存在于此类植物中，具有多种保健功能，其中最重要的是抗氧化功能。它不仅对活性氧自由基具有很强的捕捉能力，而且可以对由氧自由基诱发的生物大分子损伤起到保护作用，具有明显的抗突变、抗肿瘤、抗病毒、抗微生物、抗衰老等功能［１－６］。关于海藻中水、醇或脂溶性溶剂提取物的抗氧化活性报道甚多。研究表明褐藻多酚具有很强的自由基清除能力，是一类在药学、食品和日化等领域很有使用前景的天然抗氧化剂和自由基清除剂［７，８］。国内有关羊栖菜中的多酚和抗氧

6、化活性的研究较少。因此，以羊栖菜为原料，对其萃取物总多酚、维生素含量及抗氧化活性进行系统分析，可为羊栖菜的综合利用提供理论依据。　　１材料与方法　　１．１材料　　羊栖菜：购于山东威海青正食品有限公司。　　试剂：ＤＰＰＨ・购于美国Ｓｉｇｍａ公司，Ｆｏｌｉｎ－Ｄｅｎｉｓ试剂、维生素Ｃ和维生素Ｅ试剂盒购于南京建成生物工程研究所，其余试剂均为国产分析纯。　　试验仪器：植物粉碎机，电子天平ＢＳ２１０Ｓ，数显恒温水浴锅ＨＨ－６，旋转蒸发仪，台式离心机ＡｎｋｅＴＤＬ－５，７２２Ｓ可见分光光度计，冷冻干燥机ＡＬＰＨＡ１－２。

7、　　１．２方法　　１．２．１羊栖菜粗提物和各萃取物的制备取羊栖菜２００ｇ，清水洗净剪碎，在３０℃烘箱中烘干，用植物粉碎机打成粉末，用２Ｌ７０％的乙醇浸提。离心后取上清液，真空浓缩，冻干得粗提物，将粗提物溶于去离子水，再依次用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，浓缩冻干，分别得到氯仿萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物和萃取后剩余物，流程见图１。　　　　１．２．２总多酚含量的测定［９］标准曲线的制作：称取２５．０ｍｇ间苯三酚，用去离子水完全溶解，定容至２５ｍＬ容量瓶中，配制成浓度为１．０ｍｇ／ｍＬ的间苯三酚溶液，分别取

8、０、０．０５、０．１５、０．２５、０．３５、０．４５ｍＬ间苯三酚溶液，加去离子水稀释至７ｍＬ混合均匀，加入１ｍＬＦｏｌｉｎ－Ｄｅｎｉｓ试剂摇匀，３ｍｉｎ后加入２ｍＬ０．７ｍｏｌ／Ｌ的Ｎａ２ＣＯ３溶液，混合充分测定７１０ｎｍ处吸光度，以吸光度为纵坐标，间苯三酚浓度为横坐标作图，得标准曲线。样品总多酚含量的测定：将粗提物和各萃取物配成适当浓度的溶液，按上述步骤操作，测定７１０ｎｍ处吸光度，样品中总多酚含