羊栖菜褐藻糖胶的分离纯化及其免疫活性的研究

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1、.■'■•-.V»—*研究生学号：2012102167:.康_学校代码*leaQQ分类号《驵密级*无硕士学位论文.$:、、、鴨，'/々羊栖菜揭藻糖胶的分商纯化…及其免疫活性的研究.'Sr'-.、PurificationandImmiinoiogiciilactivitiesofl^ucoidansfromSargassumfusiformeVWWB-'作者：康磔峰:唸糧麵师：娜教授一.一学科专业：生轜化学与分子生轆学研究方向：糧复食物的结构与功能■丨学位类型.：学历領士f.东此师范大学学位评定委员会y2015年

2、6月*■*»V^独创性声明木人郑重声明：所提交的学位论文是本人在导师指导下独立进行研究工作所取得的成果。据我所知，除了特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果。对本人的研究做出重要贡献的个人和集体，均B在文中作了明确的说明。木声明的法律结果山本人承担。学位论文作者签名:学位论文使用授权书本学位论文作矜完全了解东北师范大学有关保留、使用学位论文的规定，即：东北师范大学有权保留并向国家存关部门或机构送交学位论文的复印件和电-f版，允许论文被查阅和借阅。本人授权东北师范人学可以将学位论

3、文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其它复制手段保#、汇编本学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作荞签名：

4、»年指导教师签名:J/y4

5、>日.期：(’乃U期：J〇/'.^^学位论文作者毕业后去向：I:作革位：_______________________________电话：_____通m地址：_______________________________邮编：_____学校代码：10200研究生学号：2012102167分类号：Q5密级：无硕士学位论文羊栖菜褐藻

6、糖胶的分离纯化及其免疫活性的研究PurificationandImmunologicalactivitiesofFucoidansfromSargassumfusiforme作者：康彩峰指导教师：吴明江教授学科专业：生物化学与分子生物学研究方向：糖复合物的结构与功能学位类型：学历硕士东北师范大学学位评定委员会2015年6月摘要褐藻糖胶是羊栖菜的重要活性成分之一，具有免疫调节等许多生物活性。由于褐藻糖胶分子组成复杂，极性接近，分子量分布范围较宽，分离纯化比较困难。目前对其系统的分级与活性筛选报道的不多，羊栖菜褐藻

7、糖胶免疫调节活性的分子机理还不清楚。为了解决这一问题，需对羊栖菜褐藻糖胶进行系统的分级纯化及活性筛选工作。本文依次通过水提、醇沉及盐析的方法从羊栖菜中分离出褐藻糖胶SFPF，利用DEAESepharaseCL-6B阴离子交换柱和SephacrylTMS-400凝胶色谱柱进行分级，得到SFPF-1、SFPF-2和SFPF-3三个级分。为了了解SFPF、SFPF-1、SFPF-2、SFPF-3四个级分的基本理化性质，对其总糖含量、糖醛酸含量、蛋白质含量、单糖组成、硫酸基团的含量和平均分子量的大小进行测定。通过研究不

8、同剂量的褐藻糖胶及其纯化级分在体外细胞实验（多糖浓度为10μg/ml、100μg/ml、1000μg/ml）和体内灌胃实验（多糖浓度为100mg/kg、200mg/kg、400mg/kg）对小鼠脾淋巴细胞增殖能力、NK细胞和腹腔巨噬细胞功能的影响，进而研究褐藻糖胶的免疫调节活性。对SFPF、SFPF-1、SFPF-2和SFPF-3的基本理化性质分析结果显示，SFPF-2的总糖含量最高为81.8%，其次是SFPF-1为77.8%，SFPF和SFPF-3的总糖含量分别为65.4%和68.4%；SFPF-1的糖醛酸最

9、高，为17.0%，SFPF-3最低，为7.5%，SFPF和SFPF-2的糖醛酸含量分别为12.4%和14.7%；四种级分的蛋白含量分别为1.4%、1.6%、0.4%和0.3%；SFPF-3的硫酸根含量最高，为18.3%，其次是SFPF为9.3%，SFPF-1的硫酸根含量最低为2.9%，SFPF-2为5.6%；SFPF-1、SFPF-2和SFPF-3分子量大小分别为4.4×104Da、2.4×104Da、6.0×104Da。四种级分的单糖组成主要由Man、Gal、xyl和Fuc组成，还有少量的GalA，其中四种主

10、要单糖的比例分别为SFPF：2.1：10.2：5.6：81.0；SFPF-1为1.3：4.6：8.0：82.5；SFPF-2为2.4：13.3：3.1：80.6；SFPF-3为1.0：10.0：2.2：84.1。体外细胞实验的结果表明，SFPF、SFPF-1、SFPF-2和SFPF-3既能够促进由ConA诱导的小鼠脾T淋巴细胞和LPS诱导的B淋巴细胞的增殖，也能够作为分裂原诱导小鼠脾淋