沉默Nek2基因对卵巢癌SKOV3细胞周期的影响.pdf

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1、重庆医学2015年4月第44卷第11期1463论著·基础研究doi：10．3969／j．issn．1671—8348．2015．11．007沉默Nek2基因对卵巢癌SKOV3细胞周期的影响范婷婷，唐良萏。△(：．重庆市合川区人民医院妇科，重庆合川40l520；2．重庆医科大学附属第一医院妇产科，重庆400016)[摘要]目的研究RNA千扰NIMA相关激酶2(Nek2)表达对卵巢癌细胞SKOV3细胞周期的影响及其相关的分子机制。方法将针对Nek2基因的siRNA转染至SKOV3细胞中，采用流式细胞技术检测SKOV3细胞周期变化，并用Westernblot技术检测

2、Nek2一siRNA转染入卵巢癌SK0V3细胞48h后，与细胞周期相关的因子cyclinB1、CDK1及P27蛋白表达水平以及ERK1，／2磷酸化水平的变化。结果空白对照组、阴性对照组和RNA干扰组中处于Gz／M期的细胞比例分别为13．72、12．27'／0和1．56，与两对照组比较，处于G2／M期的干扰组细胞明显减少(P<0．05)。Nek2基因沉默后，与两对照组比较，SK—oV3细胞内cyclinB1和CDK1的蛋白表达水平明显下降，P27的蛋白表达水平明显上调，SK0V3细胞内ERK1／2磷酸化水平明显下降(P<0．05)。结论沉默Nek2基因，可阻止卵

3、巢癌sK0V3细胞启动有丝分裂，从而抑制其增殖。[关键词]RNA干扰；卵巢肿瘤；细胞周期；NIMA相关激酶[中图分类号]R737．31[文献标识码]A[文章编号]167l-8348(2015)111463—03EffectofsilencingNek2geneoncellcycleofovariancancerSKOV3cellsFanTingting．TangLiangdan。(1．DepartmentofGynecology，HechuanDistrictPeoplesHospital，Chongqing401520，China；2．Department0

4、l，GynecologyandObstetrics，FirstAffilliatedHospitalofChongqingMedicalUniversity，Chongqing400016，China)[Abstract]0bjectiveTostudytheeffectofsilencingNek2viaRNAioncellcycleofovariancancerSKOV3cellsandthere—latedmolecularmechanism．MethodsTheNek2一siRNAwastransfectedintotheovariancancerSK

5、OV3cells．Thechangeofcellcy—cleofSKOV3cellsat48haftertransfectionwasexaminedbythefloweytometrytechnique；Westernblotassaywasusedtodeter—minetnechangeoflevelofthecellcyclerelatedfactorscyclinB1，CDK1，P27andthephosphorylationleveloftheERK1／2afterNek2一siRNAtransfectionfor48h．ResultsTheflo

6、wcytometrydetectionresultsshowedthattheproportionofthecellsinG2／Mstageintheblankcontrolgroup，negativecontrolgroupandRNAigroupwas13．72，12．27and1．56respectively．Comparedwiththecontrolgroup，thenumberofthecellsinG2／Mstageinthetransfectedgroupwasreducedobviously(P<0．05)．TheWeste~’nblotde

7、tectionresultsshowedthatcomparedwiththecontrolgroup，theexpressionofcyclinB1andCDK1proteininSK—OV3cellswassignificantlyreduced，theexpressionofP27wasincreasedaftersilencingNek2andthephosphorylationlevelofERKlj2inSKOV3cellswassignificantlyreducedaftersilencingNek2gene(P<0．05)．Conclusio

8、nSilencingNek2genem