测定抗-HBs的两种方法在不同温育时间的结果比较.pdf

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1、检验医学与临床2008年1O月第5卷第2O期LabMedClin,October2008,Vo1.5,No.20测定抗一HBs的两种方法在不同温育时间的结果比较王福俊,罗佳臻(上海市新港街道社区卫生服务中心200082)【摘要】目的探讨检测乙型肝炎(下称乙肝)病毒表面抗体(抗一HBs)两种方法在不同温育时间的结果差异。方法采用免疫酶法(EIA)一步法、时间分辨荧光(TRF)法检测抗一HBs,OD值在0.056~0.380之间标本温育时间变化而造成的结果值的差异。结果用30minEIA一步法检测抗

2、一HBs,结果37例弱阳性和59例阴性,再用6OminEIA一步法抗一HBs检测,结果41例呈弱阳性和55例阴性。用TRF两步法抗一HBs测定出42例弱阳性和54例阴性,发现有6例标本不同于温育3Omin的EIA一步法抗一HBs检测的结果。结论酶联免疫吸附试验作为一种固相免疫测定,抗原抗体的结合反应在固相上进行,要使液相中的抗原或抗体与固相上的特异抗体或抗原完全结合,必须在一定的温度、时间条件下反应。温育所需时间与温度成反比,尤其在冬天,标本从室温到恒温箱这一过程很容易造成实际测定温育时间不够,

3、也是造成灰区误差的原因之一。【关键词】乙型肝炎病毒表面抗体;酶促反应;边缘效应中图分类号:R446.6文献标志码:A文章编号:1672—9455(2008)20—1223~02Comparisonofanti-HBsdetectionresultswithtwomethodsanddifferentincubationtimeWANGFu-jun,LUOJia—zhen.XingangCommunityHealthServiceCenter,Shanghai200082,China[Abstra

4、ct]0bjectiveTodiscusstheanti-HBsdetectionresultswiththreedifferentincubationtime.MethodsEnzymeimmunoassay(EIA)one-stepmethodandtime-resolvedfluoroimmunoassay(TRF)wereappliedtoob—servingthedifferenceofanti-HBsdetectionresults(ODvalue:0.056—0.380)witht

5、hreedifferentincubationtime.ResultsByapplying30一minuteone-stepanti—HBsEIA,39weakpositivecasesand59negativecasesweredetected.Byapplying60一minuteEIAone-stepanti—HBstest,testresultsshowed41caseswereweakpositiveand55caseswerenegative.42weakpositivecasesa

6、nd54negativecasesweredetectedbymeansoftime-resolvedfluoroimmuno—assaytwostepmethod,inwhichsixcasesanti-HBsdetectionresultwasdifferentfromthattestedwith30~minuteone-stepanti—HBsEIAmethod.ConclusionToELISA,asolid—phaseimmunoassay,antigen-antibodyreacte

7、donsolidphase.Tomakeantigenorantibodyinliquid—phasefullyreactswithspecificantigenorantibodyonsolid-phase,apropertemperatureandincubationtimearenecessary.Incubationtemperatureisinverselyproportionaltotheincu—bationtime.Especiallyinwinter,theprocesstha

8、tsamplesaremovedfromroomtemperaturetothermostat。willleadtothelosingofrealincubationtime,whichisalsooneofthereasonsforgreyareaerror.[Keywords]hepatitisBsurfaceantibodytherelationshipbetweenenzymaticreactionandreactiontime;edgeeffect酶联免疫吸附试验(ELISA)作为一种

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