Bt抗虫水稻转育后代两种筛选方法的比较.pdf

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1、南方农业学报J0uRNAL0Fs0UTHERNAGRlcuLTuRE2叭2，43(2)：141—145ISSN2095一l191：CODENNNXAABhttp：，，、ww．nfnyxb．comDOI：103969／j：issn．2095一1191．2012．02．141Bt抗虫水稻转育后代两种筛选方法的比较李孝琼1，郭嗣斌1，韦宇1，李杰民2一，刘开强，，高国庆p(1广西农业科学院水稻研究所，南宁530007；2广西大学生命科学与技术学院，南宁530005；3南宁市新科健生物科技有限公司，南宁530003)摘要：【目的】通

2、过比较分子标记辅助选择和除草剂抗性筛选两种检测方法的优缺点，为快速、准确、经济有效地选择抗螟虫水稻转育后代提供依据。【方法】用分子标记检测和除草剂抗性筛选两种方法，对不同组合的抗螟虫转育后代进行筛选，同时采用EusA检测方法对筛选的抗性株系测定杀虫蛋白含量，比较两种筛选方法的准确性。【结果】在以T1C一19为供体亲本的4个组合169个单株中，两种筛选方法的符合率达到98．2％；而以rr2A一1为供体亲本的3个组合141个单株中，两种筛选方法的符合率达到98．6％。在随机选择的经两种筛选方法鉴定均为阳性的144个单株中，均含有

3、对应Bt抗虫基因的杀虫蛋白表达量，与亲本T1c一19、T2A一21相比，Bt抗虫水稻转育后代中个别单株的Bt蛋白含量出现大幅度下降或上升的现象。【结论】分子标记检测和除草剂抗性筛选对抗螟虫水稻转育后代的选择均有很高的准确性：分子标记检测准确可靠，且不受环境影响，但费用相对高；除草剂抗性筛选法耗费低、简便易行，但易受雨天影响。在筛选的过程中可根据现有的条件做出适宜选择。关键词：Bt抗虫水稻；分子标记辅助选择；除草剂抗性筛选；cwJc。；cw2A}中图分类号：s511．035

4、3文献标志码：A文章编号：2095一119l(201

5、2)02—014l一05Comparisonoftwoscreeningmethodsfbrdetectinginsect—LjomDarlSOn0ItW0SCreenlngmetnonS10rdeteCUnglnSeCt—resistantofIfspringofBt—transgenicricereSlStant0tISDnng0IBt—tranSgenlCrlCeLIXiao—qiong1，GU0Si—binl，WEIYul，LIJie—min2⋯，LIUKai—qiang1，GA0Guo—qing1+(1RiceRe

6、searchInstitute，GuangXiAcademyofAgriculturalSciences，Nanning530007，China；2LifeScienceandTechnologyCollege，Guang)【iUniversity，Nanning530005，China；3NanningXinkejianBiologicalTechnologyCo．，Ltd．，Nanning530003，China)Abstract：【Objective】Twoscreeningtechniques，“z．，marker—

7、assistedselectionandherbicideresistancescreeningwerecomparedtDdevelopanemcientandaccurateselectionmethodfordetectinginsec卜resistantoffspringsofBt—trans。genic“ce．【Method】Inthe6rstmethod，twoDNAmarkers1inkedto(匆JC书andCw2A采geneswererespectivelvusedtoscreenthegenomic【)N

8、Aextractedfromseedlingsofthetransgenicoffsprin只plants．Inthesecondmethod，adultplantleavesweresprayedwith300mg，LherbicideBastarandthewitheredandvellowleaveswerecountedtocalculatetherateofpositiveplantsharboringtargetgenes．]Ⅵoreover，theBtpmteincontentintheresistantpla

9、ntswasquantifiedusingELISAinordertoverifytheaccuracyoftwoscreeningmethods．【Results】11heconsistencyrateoftwoscreeningmethodswas98．2％inscreeningof1