时间分辨在检测抗-hbs优势应用

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1、时间分辨在检测抗-HBs优势应用【摘要】目的定量检测人体抗-HBs对乙肝免疫的重要性。方法用时间分辨的方法(TRFIA)、酶联免疫吸附实验(ELISA)的方法以及胶体金免疫层析(GICA)的方法比对三者结果的符合率。结果时间分辨的方法和ELISA与胶体金免疫层析的方法阳性吻合率分别为98.6%和97.7%。结论ELISA和胶体金方法只能测量乙肝抗-HBs阴性阳性结果,但对设备要求简单,回报结果迅捷,适用于大量标本的初筛;而时间分辨给出了抗-HBs的量化结果,更容易动态观察乙肝的病情发展以及疫苗注射情况。【关键词】时间分辨;酶联免疫吸附实验;胶体金;抗-HBs疫苗注射Time-res

2、olveddetectionoftheadvantagesofapplicationofanti-HBsLOUHong-zhe.ShenyangChestHospitalLaboratoryMedicine,Liaoning,Shenyang110041China【Abstract】ObjectiveQuantitativedetectionofhumananti-HBsontheimportanceofhepatitisBimmunization.MethodsComparedtheresuttime-resolvedmethod(TRFIA),enzyme-linkedimmu

3、nosorbentassay(ELISA)method,andcolloidal8goldimmunochromatographyassay(GICA).ResultsTime-resolvedmethodandELISAandcolloidalgoldimmunochromatographicmethodofpositiveconsistentratewas98.6%and97.7%.ConclusionELISAandcolloidalgoldmethodcanonlymeasureofanti-HBsnegativeHBVpositiveresults,butthedevic

4、erequiresisasimple,quickreturnresultsforscreeningalargenumberofspecimens;andtime-resolvedgiventhequantitativeresultsofanti-HBsiseasierdynamicobservetheprogressionofthedisease,aswellashepatitisBvaccinationof.【Keywords】Time-resolved;Enzyme-linkedimmunosorbentassay;Colloidalgold;Anti-HBsVaccinati

5、on我国现有1.3亿乙型肝炎病毒(hepatitisB8virus,HBS)感染者,定量检测乙型肝炎病毒抗-HBs的滴度可对接种疫苗的效果进行评估,用于判定是否需要加强免疫,还可以评估普通人群免疫力。目前国内抗定量分析有各种化学发光法和放射免疫分析,这些方法因仪器试剂昂贵或者需要使用放射元性素而无法普及应用,时间分辨荧光免疫分析采用非放射免疫标记技术,能定量检测乙型肝炎病毒标志物,是特异性及灵敏度均较高的一种新的检测方法。1对象与方法1.1研究对象检测226例标本,为某单位职工注射疫苗1年后体检抽取。空腹采静脉血3ml置促凝管内,3500r/min离心取血清备用。1.2方法与试剂时

6、间分辨采用中山达安基因股份有限公司胶体金方法采用广州万孚生物技术有限公司ELISA方法采用上海科华生物技术有限公司。1.3实验原理TRFIA法检测采用双抗原夹心分析法。用HBsAg包被反应板,加入定标品或待测样品,样品中的抗-HBs与已包被的HBsAg结合成抗体-抗原复合物,再加入铕标记的HBsAg,形成HBsAg-抗-HBs-HBsAg-DTTA-Eu复合物。增强液将复合物上的Eu3+解离到溶液中,并与增强液中的有效成分形成高荧光强度的螯合物,其荧光强度与样品中的抗-HBs浓度成正比。通过标准曲线得到样本中抗-HBs的浓度。胶体金方法试剂条上以胶体金为标记包被重组乙肝表面抗原,应

7、用免疫层析原理检测样本中的抗-HBs。抗-HBs采用双抗原夹心法检测标本中抗-HBs。1.4仪器泰莱-Ⅰ型半自动时间分辨分析系统,FWI-ⅠMICRO-DSCILLATOR振荡器,DEMⅢ型自动酶标洗板机,GDV-DV990BV4酶标仪。2操作与结果82.1结果判定TRFIA法定量检测值>10IU/L,判为阳性。ELISA法定性cutoff(CO)为阴性对照孔OD均值N×2.1,样品OD值S/CO≥1为抗-HBs阳性。胶体金法在检测区(T)及对照区(C)各出现一条红色