二硫化二砷诱导T淋巴细胞白血病细胞株凋亡的机制研究-论文.pdf

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1、·基础论著·二硫化二砷诱导T淋巴细胞白血病细胞株凋亡的机制研究王玲【摘要】目的探讨二硫化二砷诱导T淋巴细胞白血病细胞株凋亡的分子机制。方法将不同浓度的二硫化二砷与T淋巴细胞白血病细胞株共培养。采用CCK-8方法测定细胞活性；AnnexinV-PI方法测定细胞凋亡率，采用实时定量PCR在基因水平测定凋亡相关因子Bc1．2和Bax的表达。结果随着二硫化二砷药物浓度的增高，细胞活性减低，随着药物作用时间的延长，细胞活性逐渐减弱。其差异均有统计学意义。细胞凋亡结果显示：二硫化二砷药物浓度越高，细胞凋亡率越高，随着药物作用时间的延长，细胞凋亡率也越高。其差异均有统计学意义。实时荧光定量结果显示：

2、与对照组比较，10grnol／L二硫化二砷与CEM细胞共孵育48h，Bax／Bc1．2的比例升高(P<0．05)。结论二硫化二砷以时间和剂量依赖的方式抑制CEM细胞生长和诱导凋亡，诱导凋亡的机制与Bax／Bcl-2的比率增加有关。【关键词】白血病，T细胞；细胞凋亡；bc1．2相关x蛋白质；基因，bc1．2；二硫化二砷ThemechanismofarsenicsulfideinducedapoptosisofTlymphocyteleukemiacellsWANGLing．DepartmentofHematology,TaiancfCentralHospital,Taian271000,

3、ChinaEmaibwang177@163．com【Abstract】objectiveToinvestigatethemechanismofarsenicsulfideinducedapoptosisofTlymphocyteleukemiacelllineCEM．MethodsCEMceilsweretreatedwithvariousconcentrationsofArsenicsulfidefordiferenttimeperiods．CellviabilitywasdetectedbytheCCK-8assay．cellapoptosiswasexaminedbyflowcy

4、tometry．ThemRNAlevelofBaxandBcl一2wasdetectedbyRT-PCR．ResuRsWefoundthattheTlymphocyteleukemiacellsviabilitywassignificantlydecreasedfollowingtreatment、mArsenicsulfidefor24h．48h．Alongwithincreasingarsenicsulfideconcentration，thecellsviabilitywasnotablyreducedwhencomparedwiththecontrolgroup，andther

5、esultswerestatisticallysignificant．Theapoptoticratesofcellsweresignificantlyincreasedat24hand48hwithincreasingarsenicsulfideconcentration，andwere~atisticaHysignificant．ThequantRativereal--timePCRresultsshowedthattheexpressionlevelsofBax／Bcl-2ratiowereup-—regulatedinArsenicsulfide-treatedcells．Co

6、nclusionsArsenicsulfideinhibitedproliferationandinducedapoptosisofTlymphocyteleukemiacellsinadose-andtime—dependentmanner．ThemechanismofarsenicsulfideinducedapoptosisofTlymphocyteleukemiacellswasrelatedtoBax／Bcl一2upregulatiOI1．【Keywords1Leukemia，T—cell；Apoptosis；bcl一2一associatedXprotein；Genes，bc

7、l一2；Arsenicsul6de雄黄的主要成分是二硫化二砷或四硫化四砷，由材料与方法于雄黄的抗肿瘤作用使其成为抗肿瘤的热点，尤其是对恶性血液病的治疗其效果显著。本实验采用高纯度1．细胞株与药物：人T淋巴细胞白血病细胞株的二硫化二砷(arsenicsulfide)，体外观察二硫化二CEM培养于l0％的胎牛血清(fetalbovineserum，FBS)砷对T淋巴细胞白血病细胞株CEM的凋亡作用，并探的RPMI培养基中，在37℃、5％CO2、饱和