与HBV preS1黏附相关的细胞受体的研究-论文.pdf

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1、重庆医学2014年4月第43卷第1O期1221论著·基础研究与HBVpreS1黏附相关的细胞受体的研究王良宏，杨丽，潘卫，李兴，杨国珍(1．贵阳医学院医学检验学院，贵州贵阳550009；2．四川大学华西第二医院生殖中心，四川成都610041)摘要：目的通过对人肝癌细胞(HepG2)细胞膜上乙型肝炎病毒(HBV)前s1区(preS1)的结合蛋白进行分离和质谱分析，寻找与HBV黏附相关的特异受体。方法以免疫磁珠法分离与preS1肽段结合的HepG2膜蛋白，通过十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离结合蛋白，选取目的条带进行LC_Ms／MS

2、质谱分析及数据库检索。结果HepG2细胞与preS1结合的蛋白，通过sDS-PAGE电泳分离出了16条带，选取HepG2与preS1结合蛋白分离出重复性较好的6条带，质谱分析出14种蛋白。结论质谱分析的蛋白主要是与物质运输、细胞信号转导、抗原提呈、免疫调节以及能量代谢相关的蛋白。关键词：肝炎病毒，乙型；免疫磁珠；乙型肝炎病毒前S1区受体；葡萄糖调节蛋白前体78doi：1O．3969issn．1671-8348．2014．10．024文献标识码：A文章编号：1671-8348(2014)10—1221一O3Researchoncellularrecepto

3、rsassociatedwithHBVpreS1adhesionWangLianghong，YangLi。，PanWei，LiXing，YangGuozhen(1．CollegeofMedicalLaboratoryScience，GuiyangMedicalCollege，Guiyang，Guizhou550009，China；2．DepartmentofReproductiveMedicalCenter，WestChinaSecondHospitalofSichuanUniversity，Chengdu，Sichuan610041，China)Abs

4、tract：ObjectiveToseekthespecificreceptorsassociatedwithhepatitisBvirus(HBV)adhesionbyseparatingthebindingproteinoftheHBVpreS1regioninHepG2andperformingthemassspectrometry．MethodsTheimmunomagneticbeadmethodwasadoptedtOseparateHepG2membraneproteincombinedwithpreS1peptidefragmentand

5、thebindingproteinwasseparatedbythesodiumdodecylsulfatepolyacrylamidegele1ectroph0resis(SDS—PAGE)，thenthedestinationstripswasanalyzedbyLC—MS／MSmassspectrometryandretrievedbythedatabase．Results16bandswereseparatedfromHepG2membraneproteinscombinedwithpreS1bySDS-PAGE；14kindsofprotein

6、swereidentifiedfrom6bandswithbetterrepeatabilityseparatedfromHepG2membraneproteinscombinedwithpreS1．ConclusionProteinanalyzedbythemassspectrometryismainlyrelatedwiththematerialtransport，cellularsignaltransduction，antigenpresentation，immuneregulationandenergymetabolism．Keywords：he

7、patitisBvirus；immunomagneticbeads；candidatereceptorofpreS1ofhepatitisBvirus；glucoseregulatedproteinprecursor78乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus，HBV)严重危害人类健1．2．1细胞培养用含lO胎牛血清、双抗(青霉素100U／康，目前临床常用的抗病毒药物对慢性乙型肝炎(chronichep—mL，链霉素100mg／mL)的DEME高糖培养基，于5CO2、atitisB，CHB)的治疗效果并不十分理想，药物不能有效地阻止37℃恒温培养He

8、pG2细胞。HBV在细胞内的复制和再感染。HBV感染早期，病毒与细胞1．2．2细