供肝自然杀伤细胞通过上调精氨酸酶-1表达减轻肝移植急性排斥反应-论文.pdf

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1、中华实验外科杂志2014年2月第31卷第2期ChinJExpSurf．February2014．Vol_31．No．2·301·-实验研究·供肝自然杀伤细胞通过上调精氨酸酶一1表达减轻肝移植急性排斥反应黄永亨钟东佳龙天柱俞建东林泽宇李文滨万云乐【摘要】目的探讨供体肝脏自然杀伤(NK)细胞减轻大鼠肝移植急性排斥反应的作用机制。方法以Lewis大鼠为肝移植供体、BN大鼠为受体，采用改良“二袖套”法建立大鼠肝移植模型，并应用co射线照射清除供体免疫细胞以及经门静脉回输供肝NK细胞等技术，设立3个实验组：A：急性排斥组(Lewis—BN)，／z=18；B：单纯co照射排斥组(L

2、ewis．BN+供体Co照射)，n：18；C：6。Co照射+供肝NK门静脉回输排斥组(Lewis—BN+供体co照射+受体门静脉输注供肝NK细胞)，n=18。分别于术后第7天收集外周血清，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测转化生长因子．B1(TGF一131)分泌水平，同时切取移植肝行病理学检查，Westernblot法检测移植肝精氨酸酶．1(Arg一1)蛋白的表达。结果与A组比较，B组移植肝组织急性排斥反应程度明显加重，外周血TGF．131分泌水平[(28．00±6．08)g／L比(11．00±0．57)g／L)，P<0．O1]和移植肝组织Arg一1表达[(0．6

3、87±0．040)比(0．487±0．030)，P<0．05]均降低；但是，经供肝NK细胞门静脉输注后的C组移植肝组织急性排斥反应程度较B组明显减轻，外周血TGF．p1分泌水平[(11．00±0．57)g／L比(27．60±1．45)g／L，P<0．05]和移植肝组织Arg一1表达[(0．487±0．030)比(0．605-4-0．080)，P<0．05]均升高。结论供肝NK细胞可以减轻大鼠肝移植术后急性排斥反应，其机制可能与Arg一1蛋白的表达上调有关。【关键词】供肝自然杀伤细胞；精氨酸酶．1；急性排斥反应；肝脏移植；大鼠Donorlivernaturalkiller

4、cellsalleviateacutelivergraftrejectionbyup-regulationexpressionofar-ginase-1HuangYongheng，ZhongDongfia，LongTianzhu，YuJiandong，LinZeyu，LiWenbin，nYunle．DepartmentofHepatobiliarySurgery，thenAffiliatedHospital，GuangDongPharmaceuti—calUniversity，Guangzhou510080，ChinaCorrespondingauthor：LiWenb

5、in，Email：gzsurgeon@163．corn；nYunle，Email：drwanyl@163．corn【Abstract】0bjectiveToinvestigatethemachenismofdonorlivernaturalkiller(NK)cellsa11e—viatingactuerejectionafterlivertransplantation．MethodsLewisratswereusedaslivergraftdonomandBNratsasrecipients．“Lewis·BN”asacuterejectionmodelwasesta

6、blishedbythemodifiedtwo—cufmeth·od．ThedonorleukocytesweredepletedbytotalbodyirradiationofCosource。andthedonorpassengerleukocyteimmunitywerereconstitutedbytransfusiondonorliverNKcellsviaportalveinduringthecourseoftransplantationoftheiradiateliver．Threevarioustransplantationgroupsweredesig

7、ned：GroupA．acutereiectiongroup(Lewis-BN)，n=18，GroupB．Coirradiationacuterejectiongroup(Co-Lewis—BN)，／z=18．C．Coirradiation+donorliverNKcellstransfusion’viaportalveinacuterejectiongroup(Co．Lewis—BN+donorNKcells)．Therecipientsweresacrificedday7posttransplantationrespectively．