microRNA在大鼠肝移植急性排斥反应中的表达-论文.pdf

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1、中华肝胆外科杂志2013年1o月第19卷第1o期ChinJHepatobiliarySurg，October2013，Vo1．19，No．10实验研究·microRNA在大鼠肝移植急性排斥反应中的表达钟克波杨定华李湘孩林梁何华梁建坤刘潇梁博李嘉璐【摘要】目的探讨microRNA(即miRNA)在大鼠肝移植急性排斥反应中的表达情况。方法以Kamada“双袖套”法行大鼠原位肝移植术(ROLT)，分为排斥组(Lewis／BN，n一12)、无排斥组(Lewis／Lewis，一12)。术后第7d采用miRNA

2、芯片技术确定外周血miRNA表达谱，采用生物信息学方法筛选出表达差异显著的特定miRNA，进而利用qRT-PCR技术对ROLT术后第3、5、7d该特定miRNA进行定量分析，同时结合病理、肝功能结果进行动态化对比分析。结果miR-206在排斥组与无排斥组的表达差异最为显著。排斥组外周血miR一206表达从术后第3d既显著高于无排斥组(￡一8．875，P一0．001)，且表达量随术后时间延长而逐步上升(F一32．154，P<0．01)。而两组的排斥反应活动指数(RAI评分)到术后第5d、肝功能指标(T

3、Bil、ALT)到术后第7d才出现显著差异。外周血和移植肝中miR-206表达量与RAI评分呈强正相关(rs分别为0．812及0．881，P

4、ionoflivertransplantati0ninratsZHONGKP一60，NGDing—hua，LIXiang—hong，LINLiang，HEHua，LIANGJian-kun，LIUXiao，LlANGBo，LIJia—lu．DepartmentofHepatobiliarySurgery，NanfangHospital，NanfangMedicalUniversity，Guangzhou510515，ChinaCorrespondingauthor：YANGDing—hua，Emai

5、l：dhyang5810／yahoo．com[Abstract]0bjectiveToinvestigatetheroleofmiRNAexpressionintheacuterejectionoflivertransplantationinrats．MethodsTheratorthotopiclivertransp1antation(R0LT)wasperformedu—singthetwo—cufftechniquedescribedbyKamadawithmodification．Ratsw

6、ererandomlydividedintotwogroups，arejectiongroup(，z一12)andacontrolgroup(一12)．MicroRNAmicroarraytechnolo—gYwasusedtoscreenthemicroRNAexpressionprofileinperipheralbloodonthe7thpostoperativeday，andthebioinformaticsmicroRNAscreeningmethoddetectedthatmiR一206

7、hadthebiggestdiffer—enceinexpression1eve1．Peripheralbloodsamplesweregatheredbefore，3days，5days，and7daysafterROLTtoanalyzetheexpression1evelofmiR-206quantitativelywithqRT—PCRtechnology．Dy—namiccontrastanalysiswasmadebetweenthequantitativeresultsofmiR一20

8、6andtheresultsofpatho—logica1examinationandliverfunctiontests．ResultsTherewasnosignificantdifferenceinmi1206expressionlevelbetweentherejectiongroupandcontrolgroupbeforetheoperation(一0．105，P一0．921)．Mi12O6expressionwassignificantlyhigheri