内皮微粒在大鼠肾移植急性排斥反应中的意义

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1、。：C??：，．目录ffllllIlllrIIIIIIIfflj＼1800494中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯：⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．3英文缩写一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．6研究论文内皮微粒在大鼠。肾移植急性排斥反应中的意义引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7第一部分大鼠肾移植后EMP的数量和表型与急性排斥反应的关系前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．9fjU舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．材料与方法⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．10结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．15；口7K⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．1)附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．17附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．‘⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29讨{念⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．31小结．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯35参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．35第二部分EMP调节TI-IP．1细胞表达细胞因子的作用—1L—jL．日lJ舌

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．38材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．39结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．46附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．49附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．56讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．57小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．61参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．61结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．64综述内皮

4、微粒及其在疾病中的研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．65个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．79中文摘要内皮微粒在大鼠肾移植急性排斥反应中的意义摘要目的：研究大鼠肾移植术后循环内皮微粒(EMP)的数量和表型与急性排斥反应病理的关系，并通过体外研究观察其对单核细胞功能的影响，阐明EMP参与急性排斥反应的部分机制。方法：1．建立大鼠肾移植模型：参考国内外经典的大鼠肾移植模型方法的基础上分别对动、静脉吻合术式进行适当改进，成功建立了大鼠原位肾移植模型。2．实验动物分组及标本采集：(1)同基因移植组(syn一，9例)：供、受者均为雄性SD大鼠；(2)异基因

5、移植组(allo．，9例)：供者为Wistar大鼠，受者为SD大鼠。实验大鼠于造模后第5天经腹主动脉取血5ml(抗凝)，高速离心分离得到EMP；同时摘取移植肾脏，10％中性甲醛固定。3．移植肾脏病理学检测：固定的移植肾脏标本石蜡切片，HE染色。采用Banff97标准对移植肾脏排斥反应的病理学改变程度进行分级评分；4．移植受体血浆EMP数量和表型分析：分离得到的EMP采用流式细胞术分析EMP的数量和表型，采用Spearman秩相关分析EMP数量及表型和移植术后排斥反应程度的相关性。5．体外EMP的产生与鉴定：TNF．Q刺激培养的人脐静脉内皮细胞株EAhy926产生EMP，用流式细

6、胞术分析其数量和表型。6．EMP对人单核细胞株THP一1细胞产生细胞因子的影响：按EMP与THP．1细胞的数量的比例分别分为：l：10组、1：50组、1：100组、1：150组；另设1O“∥mlLPS作为阳性对照组，PBS组作为阴性对照组，用TNF．Q刺激THP。1细胞48小时后离心分离EMP时得到的培养上清作为刺激物为上清对照组。ELISA方法测定不同浓度的EMP刺激THP．1细胞分泌TNF—Q、IL．6的水平。7．运用RT-PCR方法测定不同浓度的EMP对T唧．1细胞表达MCP．1mRNA、HLA．DRmRNA水平的影响，探讨EMP参与免疫应答的部分机制。结果：1．成功建立

7、大鼠原位肾移植模型，供肾动静脉吻合时间45±5min，手术时间150±10rain，术后大鼠状态好，无并发症。2．异基因组移植’肾脏表现为典型急性排斥反应病理学改变：同基因移植组和异基因移植组移植肾脏Banff病理学评分分别为(O．78±1．09)和(5．22±0．83)，中文摘要有显著性差异(尸