喹乙醇致大鼠肝脏损伤的实验研究-论文.pdf

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1、毒理学杂志2014年6月第28卷第3期JToxieolJune2014Vo1．28No．3中图分类号：R992文献标识码：A文章编号：1002—3127(2014)03—0208—04·实验研究·喹乙醇致大鼠肝脏损伤的实验研究金丽丽，薛玲，曹福源，孟春燕，关维俊，张艳淑(1．河北联合大学公共卫生学院毒理教研室，河北唐山063000；2．河北省煤矿卫生与安全实验室)【摘要】目的探讨喹乙醇(OLA)染毒对实验大鼠肝脏炎症反应及抗氧化酶活性的影响，为OLA致肝损伤机制研究提供理论依据。方法健康雄性sD大鼠32只(SPF级)，随

2、机分为对照组、20mg／kgOLA组、40mr,／kgOLA组和60mg／kgOLA组，每组实验动物8只。不同剂量OLA染毒组大鼠通过灌胃给不同浓度等体积的OLA溶液；对照组灌胃等体积双蒸水。染毒4周后处死大鼠，留取肝组织做病理观察，应用酶联免疫吸附(ELISA)测定肝组织中自细胞介素-6(IL一6)和肿瘤坏死因子。Ot(TNF—Ot)含量，检测血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)和乳酸脱氢酶(LDH)活性，以及肝脏总抗氧化能力(T—AOC)和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧

3、化物酶(GSH—Px)、过氧化氢酶(CAT)活性。结果随着OLA染毒剂量的增加，血清中ALT、AST、ALP和LDH含量逐渐升高；肝组织中T·AOC和SOD、GSH．Px、CAT活性逐渐降低。与对照组比较，OLA组肝组织中TNF一0【分别升高了11．68％、12．74％和19．33％，差异有统计学意义(P<0．05)；IL一6分别升高了45．99％、70．81％和82．92％，差异有统计学意义(P<0．05)；大鼠肝组织TNF．0【和IL．6含量与染毒剂量呈正相关(r=0．948，P=0．026和r=0．954，P=0．

4、023)。大鼠肝脏病理观察，OLA组大鼠肝脏汇管区炎性细胞浸润明显。结论OLA染毒可致大鼠肝组织中发生炎症反应，继而引起肝组织损伤。【关键词】喹乙醇；总抗氧化能力；白细胞介素一6；肿瘤坏死因子一仪；炎症反应喹乙醇(Olaquindox，OLA)是一种人工合成的氧化大鼠32只，体重180～220g，购自北京维通利华实验喹嗯啉类广谱抗菌促生长剂，被广泛应用于畜牧业生动物有限公司，合格证号：SCXK(京)2009—0017。将产和动物疾病治疗。由于使用剂量和方法不当，出现实验动物随机分成了4组，即对照组、20mg／kgOLA大

5、量的OLA中毒事件。研究表明OLA具有遗传毒组、40mg／kgOLA组和60mg／kgOLA组，每组实验动性⋯、生殖毒性、致畸致突变毒性，并可诱导多物8只，实验组大鼠通过灌胃给不同浓度等体积的个组织器官发生变性、坏死，以肝损伤较为普遍。OLA溶液；对照组灌胃等体积的双蒸水，连续4周。近年来对OLA致肝脏损伤的研究报道很多，OLA大鼠在屏障动物实验室饲养，自由饮水。中毒可致鲤鱼肝细胞凋亡，使鸡肝脏水肿、质脆易1．2主要试剂和仪器OLA(含量为98％)购自上海碎J，小鼠肝脏出血肿大坏死。班曼曼等¨的研究源叶生物科技有限公司，

6、大鼠IL．6酶联免疫分析试剂表明OLA能够抑制人源肝细胞的生长，诱导细胞DNA盒和大鼠TNF-仅酶联免疫分析试剂盒购自上海研生损伤。OLA还可损伤人肝癌细也HepG一2的抗氧化系技术有限公司，ALT、AST、ALP、LDH、T·AOC、SOD、统，诱导其凋亡¨，而OLA敏肝脏损伤的详细机制GSH—Px和CAT试剂盒均购自南京建成生物技术有限还不清楚，OLA暴露致肝脏炎症反应方面的研究还未公司。Versamaxplus酶标仪购自美国分子仪器公司。见报道。本研究通过对OLA染毒大鼠肝脏中炎性因1．3生物样品采集染毒4周后，处

7、死大鼠，腹主动子白细胞介素一6(IL一6)和肿瘤坏死因子一Ot(TNF-仅)的脉采血，离心(2500r／min)×10rain取血清，取肝组含量检测，旨在探讨OLA对大鼠肝脏炎症反应的影织分装，一80℃保存，待测。响，将为进一步阐述OLA肝损伤机制提供有力依据，1．4肝组织炎性因子检测用ELISA方法检测大鼠同时也为寻找预防靶点提供新的信息。肝组织中IL．6和TNF．含量，具体方法按试剂盒说明书操作。1材料与方法1．5肝组织肝功能指标检测和总抗氧化能力及抗氧1．1实验动物分组及染毒方法健康雄性SPF级SD化酶活性检测用试

8、剂盒检测大鼠血清中ALT、AST、ALP、LDH活性及肝组织中T—AOC、SOD、CAT、GSH—Px基金项目：国家环保部环保公益科研专项(201109038)的活性，具体方法按试剂盒说明书操作。作者简介：金丽丽，硕士研究生，研究方向：分子毒理学。1．6肝组织病理学观察按照常规病理学方法对大通讯作者：张艳淑，博士，教