小干扰RNA靶向沉默CXCR2基因抑制肝癌细胞的增殖-论文.pdf

《小干扰RNA靶向沉默CXCR2基因抑制肝癌细胞的增殖-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、·438·工程杂志2013年l2月第19卷第期h』旦i塑Eg：旦b丛2Q1!：!Q：论著小干扰RNA靶向沉默CXCR2基因抑制肝癌细胞的增殖谢斌辉王小农刘凤恩何晓谢元康周奇【摘要】目的研究CXCR2一小干扰RNA(siRNA)基因体外抑制肝癌细胞增殖的作用。方法将CXCR2．siRNA以脂质体转染法转染肝癌细胞hepG：，24h后荧光显微镜观察细胞荧光含量。采用RT—PCR及免疫印迹法分别检测正常肝Chang细胞、未转染肝癌hepGz细胞以及转染CXCR2一siRNA基因后hepG2细胞在转染24、48、72hA的CXCR2mRNA和蛋白表达水平。以未转染的hepG2细胞为对照．CCK8

2、法检测转染CXCR2。siRNA的hepG2细胞在转染24、48、72h后的增殖。以未转染的hepG：细胞为对照，检测转染CXCR2一siRNA24h后hepGz细胞与Transwell小室孵育24h时的侵袭能力。结果CXCR2一siRNA转染hepG224h后镜下可见大量绿色荧光，转染率为80％。hepG2细胞CXCR2mRNA和蛋白表达水平高于Chang细胞(mRNA：1．69_+0．22比0．63_+0_31，蛋白：1．93_+0．25比0．84_+0．29，均P<0．05)。转染CXCR2．siRNA24和48h后hepG2细胞CXCR2mRNA表达量低于未转染的hepG2细胞(

3、0．75±0．24、0．83±0．21比1．78_+0．25，均P<0．05)，72h后CXCR2一siRNA虽然仍能抑制hepG2细胞CXCR2mRNA的表达，但与未转染的hepG2细胞相比差异并无统计学意义(1．35_+0．18比1．78_+0．25，P>0．05)。转染CXCR2一siRNA24和48h后的hepG2细胞CXCR2蛋白表达低于未转染的hepG2细胞(0．91_+0．25、1．16_+0．23比1．98_+0．31，均P0．05)。转染CXCR2一s

4、iRNA24、48、72h后hepG2细胞mRNA和蛋白表达差异均无统计学意义。与未转染的hepG2细胞相比，转染CXCR2一siRNA24、48、72h后hepG2细胞增殖受到抑制(均P<0．05)。转染CXCR2一siRNA的hepG2细胞对Transwell小室的侵袭能力明显低于未转染的hepG：细胞[(36_+5)个／高倍视野(x200)比(526_+9)个／高倍视野(×200)，P<0．05]。结论siRNA沉默CXCR2基因体外可有效抑制肝癌细胞的增殖。【关键词】RNA，小分子干扰；受体，白细胞介素8B；肝肿瘤，实验性；基因沉默TargetedsilencingofCXCR2

5、viasmallinterferenceRNAforinhibitionoflivercarcinomacellsproliferationXIEBin—hui，WANGXiao—nong，LIU一en，HEXiao，XIEYuan—kang，ZHOUQi．DepartmentofGeneralSurgery，TheFintAffiliatedHospital，GannanMedicalUniversity，JiangxiGanzhou341000，ChinaCorrespondingauthor：ZHOUQi，DepartmentofHepatobiliarySurgery，TheFi

6、rstAffiliatedHospital，SunYat—senUniversity，Guangzhou510120，China．Emaif：hnzhouqi@163．con【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheinhibitoryeffectofsiRNA—CXCR2oninvitroproliferationofhepatocellularcarcinoma．MethodsCXCR2一siRNAplasmidwastransfectedbyusingtheliposometechniqueintohepG2，thehepatocellularcarci

7、nomacells，forthedeterminationoffluorescenceunderfluorescencemicroscopeathour24．TheexpressionofCXCR2mRNAandproteinintheChangcellsderivedfromnormallivertissues．untransfectedhepG2cellsandthehepG2cellstransfectedwithsiRNA—