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1、824细胞与分子免疫学杂志(ChinJCellMol[mmuno1)2014,30(8·论著·文章编号:1007—8738(2014)08—0824—05去甲斑蝥素和吴茱萸碱联合处理对HepG2人肝癌细胞生长的抑制作用刘裕民,张景勃,游智梅,廖红(重庆医科大学:药物高校工程中心,干细胞与组织工程研究室,重庆400016)[摘要]目的研究去甲斑蝥素(NCTD)与吴茱萸碱(EVO)联合处理对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响。方法以不同浓度的NCTD和不同浓度的EVO分别组成单药处理组和NCTD、EVO联合处理组,另设不加药的对照组,作用于HepG2细胞。MTr法检测NCTD、EVO单药及联用
2、对HepG2细胞的增殖抑制作用,流式细胞术检测细胞周期,annexinV—FITC/PI双染色结合流式细胞术检测药物对HepG2细胞凋亡的影响。Westernblot法检测Bak、Bel-2蛋白的表达。结果MTr法证明NCTD和EVO对HepG2细胞的生长有抑制效果,两药联合处理具有明显的协同抑制作用(合用指数CI<1);与单一处理组相比,NCTD联合EVO上调G2/M期阻滞率(P<0.05),G2/M期阻滞率分别为EVO(36.13±1.63)%、NCTD(10.67±0.89)%、联合处理(73.42±1.92)%;此外,两药联合处理的肝癌细胞凋亡率由EVO(15.784-3.08)%
3、、NCTD(11.47±1.60)%,显著上升到联合处理的(21.864-2.70)%(P<0.05);Westernblot结果显示,与单独处理相比较,联合处理组Bax蛋白表达水平增高,Bel-2表达降低(P<0.05)。结论NCTD和EVO联合处理抑制肝癌细胞增殖并促进细胞凋亡。[关键词]联合用药;吴茱萸碱;去甲斑蝥素;抗癌;凋亡[中图分类号]R392—33,Q253,Q255,Q279【文献标志码]AInhibitoryefectofnorcantharidincombinedwithevodiamineonthegrowthofhumanhepaticcarcinomacellli
4、neHepG2invitroLIUYumin,ZAHNGJingqing,YOUZhimei,LIAOHongMedicineEngineeringResearchCenter,ChongqingMedicalUniversity;LaboratoryofStemCellandTissueEngineering,DepartmentofHistologyandEmbryology,ChongqingMedicalUniversity,Chongqing400016,ChinalAbstractJobjectiveToinvestigatethecombinedefectofevodiami
5、ne(EVO)andnorcantharidin(NCTD)onHepG2cells.MethodsHepG2cellsweretreatedwithEVOor/andNCTDatdiferentconcentrations加vitro.withblankculturemediumasthenegativecontro1.TheinhibitoryefectofEV0or/andNCTDwasdeterminedbVM1-rassay.CelIcycleandcellapoptosiswereassessedbyflowcytometry(FCM)combinedwithPIstainin
6、gandannexinV-FITC/PI,respectively.TheexpressionsofBaxandBcl-2wereexaminedbyWesternbloting.ResultsMTTassayshowedthatNCTDandEVOhadrestrainingefectonthegrowthofHepG2cells.ThecombinationofNCTDandEVOhadsignificantsynergisticinhibitionefect(CI<1).ThearrestrateofG2/Mphasewas(36.13±1.63)%intheEVOinducedgr
7、oupand(10.67±0.89)%intheNCTDinducedgroup,andthecombinationofEVOandNCTDup—regulatedtherateto(73.424-1.92)%(P<0.05).Inaddition,theapoptosisrateofHepG2cellstreatedbytwo-drugcombinationincreasedsignificantlyfrom(15.7
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