去甲斑蝥素和吴茱萸碱联合处理对HepG2人肝癌细胞生长的抑制作用-论文.pdf

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1、824细胞与分子免疫学杂志(ChinJCellMol[mmuno1)2014，30(8·论著·文章编号：1007—8738(2014)08—0824—05去甲斑蝥素和吴茱萸碱联合处理对HepG2人肝癌细胞生长的抑制作用刘裕民，张景勃，游智梅，廖红(重庆医科大学：药物高校工程中心，干细胞与组织工程研究室，重庆400016)[摘要]目的研究去甲斑蝥素(NCTD)与吴茱萸碱(EVO)联合处理对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响。方法以不同浓度的NCTD和不同浓度的EVO分别组成单药处理组和NCTD、EVO联合处理组，另设不加药的对照组，作用于HepG2细胞。MTr法检测NCTD、EVO单药及联用

2、对HepG2细胞的增殖抑制作用，流式细胞术检测细胞周期，annexinV—FITC／PI双染色结合流式细胞术检测药物对HepG2细胞凋亡的影响。Westernblot法检测Bak、Bel-2蛋白的表达。结果MTr法证明NCTD和EVO对HepG2细胞的生长有抑制效果，两药联合处理具有明显的协同抑制作用(合用指数CI<1)；与单一处理组相比，NCTD联合EVO上调G2／M期阻滞率(P<0．05)，G2／M期阻滞率分别为EVO(36．13±1．63)％、NCTD(10．67±0．89)％、联合处理(73．42±1．92)％；此外，两药联合处理的肝癌细胞凋亡率由EVO(15．784-3．08)％

3、、NCTD(11．47±1．60)％，显著上升到联合处理的(21．864-2．70)％(P<0．05)；Westernblot结果显示，与单独处理相比较，联合处理组Bax蛋白表达水平增高，Bel-2表达降低(P<0．05)。结论NCTD和EVO联合处理抑制肝癌细胞增殖并促进细胞凋亡。[关键词]联合用药；吴茱萸碱；去甲斑蝥素；抗癌；凋亡[中图分类号]R392—33，Q253，Q255，Q279【文献标志码]AInhibitoryefectofnorcantharidincombinedwithevodiamineonthegrowthofhumanhepaticcarcinomacellli

4、neHepG2invitroLIUYumin，ZAHNGJingqing，YOUZhimei，LIAOHongMedicineEngineeringResearchCenter，ChongqingMedicalUniversity；LaboratoryofStemCellandTissueEngineering，DepartmentofHistologyandEmbryology，ChongqingMedicalUniversity，Chongqing400016，ChinalAbstractJobjectiveToinvestigatethecombinedefectofevodiami

5、ne(EVO)andnorcantharidin(NCTD)onHepG2cells．MethodsHepG2cellsweretreatedwithEVOor／andNCTDatdiferentconcentrations加vitro．withblankculturemediumasthenegativecontro1．TheinhibitoryefectofEV0or／andNCTDwasdeterminedbVM1-rassay．CelIcycleandcellapoptosiswereassessedbyflowcytometry(FCM)combinedwithPIstainin

6、gandannexinV-FITC／PI，respectively．TheexpressionsofBaxandBcl-2wereexaminedbyWesternbloting．ResultsMTTassayshowedthatNCTDandEVOhadrestrainingefectonthegrowthofHepG2cells．ThecombinationofNCTDandEVOhadsignificantsynergisticinhibitionefect(CI<1)．ThearrestrateofG2／Mphasewas(36．13±1．63)％intheEVOinducedgr

7、oupand(10．67±0．89)％intheNCTDinducedgroup，andthecombinationofEVOandNCTDup—regulatedtherateto(73．424-1．92)％(P<0．05)．Inaddition，theapoptosisrateofHepG2cellstreatedbytwo-drugcombinationincreasedsignificantlyfrom(15．7