OPN影响小鼠MSCs迁移及其相关分子机制研究-论文.pdf

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1、重庆医学2014年2月第43卷第4期391·论著·OPN影响小鼠MSCs迁移及其相关分子机制研究李薇，王文平，陈亮，王珍祥△，李世荣(第三军医大学附属西南医院整形外科，重庆400038)摘要：目的探讨外源骨桥蛋白(OPN)对小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)迁移能力的影响。方法采用OPN一／一小鼠和野生型C57小鼠，进行MSCs的原代分离培养，流式细胞术鉴定分拣MSCs细胞传代培养；Transwell迁移实验检测0PN是否能够诱导MSCs定向迁移；蛋白免疫印迹法(westernblot)检测OPN、CD44

2、和Integrin131相关蛋白的表达变化。结果传代后的细胞形态符合MSCs特征，细胞表达cD44和CD105，但不表达CD34，符合MSCs表面标记抗原的一般规律。O．5／~g／mL的OPN能增加体外MSCs的细胞迁移，而野生型C57小鼠MSCs细胞迁移为最多。同时，这一趋势与OPN作用时间正相关，与OPN一／一小鼠相比，差异均有统计学意义(JP<0．05)。0．5g／mL重组0PN蛋白量明显增加，但仍低于野生型C57小鼠，差异有统计学意义(P

3、／mL重组OPN组CD44、Integrin81蛋白表达增多，差异有统计学意义(P<0．01)；而野生型C57小鼠细胞CD44、IntegrinB1蛋白表达最多，差异有统计学意义(P<0．01)。结论OPN可以通过上调CD44、Integrin61的表达，促进MSCs定向迁移。关键词：骨桥蛋白质；骨髓间充质干细胞；细胞运动；分子机制doi：10．3969／j．issn．1671-8348．2014．04．003文献标识码：A文章编号：167I-8348(2O14)O4一O391一O3Studyonthee

4、ffectsofOPNonmigrationofMSCsanditsmolecularmechanisminmiceL，WangWenping，ChenLiang，WangZhenxiang，LiShirong(DepartmentofPlasticSurgery，SouthwestHospital，ThirdMilitaryMedicalUniversity，Chongqing400038，China)Abstract：0bjectiveToinvestigatetheeffectsofexogenou

5、sosteopontin(OPN)themigrationofbonemarrowmesenchymalstemcells(MSCs)inmice．MethodsUsingtheOPN一／一andwild—typeC57mice，theMSCswereisolatedandcultured．Thesecellswereanalysedandsortedbyflowcytometry．Then，TranswellmigrationassaydetectedwhetherCIPNcaninducethemig

6、rationoftheseMSCs．Finally，themethodofWesternblotwasusedtodetectthechangesofexpressionofOPN，CD44andIntegrin131pro—teins．ResultsThemorphologyandfeaturesofMSCswereprovedcorrectlyon3passages，whichthesecellsexpressedtheproteinsofCD44andCD105，butnotCD34．Thesurf

7、acemarkerantigenswereaccordedwiththegenera1featuresofMSCs．Comparedwith0PN一／一mice．theMSCssignificantlyincreasedcellmigrationingroupsof0．5~g／mLOPNandwildtypeC57mice，whichwaspositivelyrelatedtothetimesusingOPN．UsingrecombinantOPNprotein(0．5／,g／mL)，expression

8、ofrelatedproteinswassignifi—cantlyincreased．butstilllowerthanthegroupofwildtypemice(P<0．01)．ComparedwithOPN一／一mice，expressionofOPN，CD44．andIntegrint31proteinincreasedsignificantlydifferent(P<0．01)ingroupsof0．5／,g／mL