HIF—1α基因表达沉默对肝癌细胞P13K／AKT信号转导通路影响的研究-论文.pdf

《HIF—1α基因表达沉默对肝癌细胞P13K／AKT信号转导通路影响的研究-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、倪嘉延，等HIF一1a基因表达沉默对肝癌细胞PIaK／AKT信号转导通路影响的研究《实验研究／论著lHIF—la基因表达沉默对肝癌细胞PI3K／AKT信号转导通路影响的研究倪嘉延吴裕丹许林锋孙宏亮陈耀庭中山大学孙逸仙纪念医院(介入放射科：倪嘉延，许林锋，孙宏亮，陈耀庭；血液科：吴裕丹)，广东广州510120【摘要】目的：探讨沉默缺氧诱导因子一la(hypoxiainduciblefactor-la，HIF-la)基因表达对肝癌细胞PI3K／AKT信号转导通路的影响。方法：选用大鼠CBRH一7919肝癌细胞株作为研究对象，利用氯化钻(CoC1z)建立厌氧模型。

2、构建HIF-1a小分子干扰RNA(smallinterferingRNA，siRNA)特异性载体复合物，小分子RNA干扰技术沉默肝癌细胞HIF-I~的基因表达，分别利用RT-PCR和免疫印迹法检测肝癌细胞HIF_1d、血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor，VEGF)、磷酸化AKT(p-AKT)、AKT和PI3K在mRNA和(或)蛋白水平的表达变化。结果：肝癌细胞在缺氧条件下表达HIF_1d较常氧对照组显著增多，差异具有统计学意义，Pw一0．002，P§自一0．003。特异性HIF_1asiRNA表达载体转染肝癌细胞

3、后，肝癌细胞HI卜1d(PRNA和P*自均<0．001)、VEGF(PRNA一0．001，P女自<0．001)和p-AKT(P自<0．001)的表达明显减少；AKT和PIaK的表达显著增多，与对照组的差异均具有统计学意义，P§自值分别为0．032和0．020。结论：特异性siRNA干扰沉默HIF一1a基因表达可抑制肝癌细胞PI3K／AKT信号转导通路的激活。【关键词】肝肿瘤；缺氧诱导因子一1a；RNA干扰；血管内皮生长因子；蛋白激酶B中华肿瘤防治杂志，2014，21(5)：356—359EffectsofHIF_-l仅silencingonthePI3K／A

4、KTtransductionsignalingpathwayinhepatomacellsNIJia—yan，W【，Yu—dan，XULin一ng，SUNHong—liang，CHENYao—tingSunYat—senMemorialHospital，SunYat—senUniversity，Guangzhou510120，P．R．China[ABSTRACT]OBJECTIVE：TostudytheeffectsofHIF—lasilencingonthePI3K／AKTtransductionsignalingpathwayinhepatomaceil

5、s．METH0DS：RatCBRH一7919hepatomacellswasusedforthisstudyandthehypoxiamodelwasmadeU—singCoC12．HIF1aspecificRNAisequencecompoundwasconstructedandtransfectedintocells．AfterthetransfectionofspecialsiRNA，rea1timeRT—PCRandwesternblotanalysiswereusedtodetecttheexpressionsofHIF1d，VEGF，p-AKT，

6、AKTandPI3KonmRNAand／orproteinleve1．RESULTS：UndertheCoC12causedhypoxia，theexpressionlevelsofmRNAandproteinofHIF1dweresignificantlyincreasedwithstatisticsignificance(PRNA一0．002，P。r0I一0．003)．AfterthespecificsequenceofHIF_1siRNAtransfected，comparedwithcontrolgroup，inexperimentalgroupth

7、eexpres—sionsofHIF_1q(PRNA

8、inhib—ittheactivationofPI3