P13K／AKT／mTOR信号传导通路在姜黄素抑制人肝癌细胞Cox-2表达中的作用-论文.pdf

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1、3O解放军医学杂志2014年1月1日第39卷第l期论著PI3K／AKT／mTOR信号传导通路在姜黄素抑制人肝癌细胞Cox一2表达中的作用李帅帅，孙军[摘要]目的探讨MAPK和PI3K信号传导通路在姜黄素调节的环氧合酶2(Cox．2)表达中的作用。方法分别加入25、50mo1／LLY294002，10、20~mol／LU0126，5、lOng／ml~莫司(雷帕霉素，rapamycin)处理人肝癌细胞BEL．7402，30min后加入lOl,~mol／L姜黄素，对照组单独加入0、10txmol／L姜黄素，培养6h后

2、，采用RT．PCR和Westernblotting方法检测BEL．7402细胞中Cox2mRNA和蛋白的表达。以不同浓度(0、2．5、5、10、15、20~mol／L)姜黄素或25~mol／LLY294002处理BEL．7402细胞，培养6h后，采用Westernblotting检测总AKT蛋白和磷酸化AKT蛋白的表达；以不同浓度(0、2．5、5、10、15、20~tmol／L)姜黄素或10~xmol／LU0126处理BEL．7402~m胞，培养6h后，采用Westernblotting检测总ERK蛋白和磷酸化

3、ERK蛋白的表达。结果与仅加入10[xmol／L姜黄素的BEL7402细胞比较，分别加入25、50~tmol／LLY294002，5、10ng／mlt~莫司后，BEL7402细胞中的Cox2mRNA和蛋白表达均明显降低，差异有统计学意义(P0．05)。采用不同浓度姜黄素或25~mol／LLY294002处理后，BEL．7402细胞磷酸化AKT蛋白表达逐渐降低，与对照组相比差异有统计学意义(P

4、明显变化(P>o．05)。不同浓度姜黄素或10~mol／LU0126处理后，BEL．7402~胞磷酸化ERK蛋白和~,ERK蛋白表达与对照组相比均无明显变化(P>o．05)。结论姜黄素可能通过PI3K／AKT／mTOR信号传导通路抑制人肝癌细胞BEL．7402中Cox．2的表达。[关键词]姜黄素；肝肿瘤；环氧化酶2[中图分类号]R735．7[文献标志码]A[文章编号]0577．7402(2014)01．0030—05[DOI]10．11855／j．issn．0577．7402．2014．01．07RoleofP

5、I3K／AKT／mTORpathwayintheexpressionofCox一2ininhibitionofhumanhepatocellularcarcinomacellsbycurcuminL1Shuai—shuai．SUNJunLiaoningMedicalUniversity,Jingzhou,Liaoningj21001JChinaDepartmentofGastroenterology,]ingzhouCentralHospital,Jingzhou,Liaoning121004,China【Ab

6、stract]ObjectiveToinvestigatetherolesofMAPKandPI3KsignaltransductionpathwayintheexpressionofCox-2regulatedbycurcumininhumanhepatocellularcarcinomaBEL一7402cells．MethodsBEL一7402cellswerepretreatedwith20or50txmol／LofLY294002，10or20p．mol／LofU0126and5or10ng／mlofr

7、apamycinfor30minutesfollowedbytreatmentwith10~mol／Lofcurcumin．TheBEL-7402cellsincontrolgroupweretreatedwith0or10txmol／Lofcurcuminalone．Afterbeingculturedfor6hoursJtheexpressionofCox-2mRNAandproteinweredeterminedbyRT-PCRandWesternblotting．BEL-7402ceilsweretre

8、atedwithdifferentconcentrationsofcurcumin(0J2．5，5，10，15，20~mol／L)or25pomol／LofLY294002for6hours，andphosphorylatedAKTandtotalAKTweredetectedbyWesternblotting．BEL一7402cellsweretreatedwithdifferent