叔丁基对苯二酚对热应激小鼠肝脏氧化损伤的缓解作用-论文.pdf

《叔丁基对苯二酚对热应激小鼠肝脏氧化损伤的缓解作用-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、动物营养学报2014，26(9)：2779—2788ChineseJournalofAnimalNutritiondoi：10．3969／j．issn．1006-267x。2014．09．041叔丁基对苯二酚对热应激小鼠肝脏氧化损伤的缓解作用周鑫黄毅李延森李春梅(南京农业大学动物科技学院，南京210095)摘要：本试验旨在研究叔丁基对苯二酚(tBHQ)对热应激小鼠肝脏氧化损伤的影响。试验选用50只6周龄ICR雄性小鼠随机分为2组，每组25只，tBHQ(一)组饲喂基础饲粮，tBHQ(+)组饲喂基础饲粮中

2、添加1％tBHQ的试验饲粮。饲喂14d后，小鼠每天进行42℃2h热应激处理，连续8d。在热应激之前(热应激0d)和热应激l、2、4、8d，每组各取5只小鼠处死，采集肝脏，测定肝脏重量和抗氧化指标，免疫组织化学方法检测转录因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶l(HO—1)蛋白表达，实时定量PCR法测定Nrf2及其调控表达基因的表达量。结果表明：1)tBHQ(一)组肝脏指数在热应激4d恢复正常水平，而tBHQ(+)组在热应激2d即恢复正常水平。2)与tBHQ(一)组相比，热应激0d，tBHQ(+)

3、组肝脏总超氧化物歧化酶(T—SOD)活力显著升高(P<0．05)，在热应激4d时，还原型谷胱甘肽含量以及T—sOD、铜，锌超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶活力显著降低(P<0．05)。3)热应激2d，tBHQ(一)组比tBHQ(+)组肝脏损伤情况更为严重。4)热应激0d，tBHQ(一)组未检测到Nrf2蛋白在肝脏组织表达，热应激后各时间点都检测到Nrf2蛋白的表达，而tBHQ(+)组在各阶段均有表达；tBHQ(一)组在热应激0、l、4和8d都检测到HO一1蛋白的表达，而tBHQ(+)组在

4、热应激0、l和2d时检测到了HO·1蛋白的表达。5)与tBHQ(一)组相比，tBHQ(+)组多个Kelch样ECH相关蛋白(Keap1)一Nf2／ARE信号通路相关基因表达量均显著升高(P<0．05)。综上所述，饲粮添加l％tBHQ对热应激造成的小鼠肝脏氧化损伤能够起到一定的缓解作用。关键词：叔丁基对苯二酚；肝脏；热应激；氧化损伤中图分类号：S852．2文献标识码：A文章编号：1006-267X(2014)09．2779—10在现代畜牧生产过程中，高密度、集约化生产42℃全身热应激，发现热应激后小鼠体

5、重减轻，体带来的各种应激因素越来越受到人们的重视，其表温度和直肠温度显著升高，睾丸和附睾组织丙中高温带来的热应激是一种常见的危害畜牧业的二醛(MDA)含量以及活性氧自由基(ROS)、超氧不利因素。通过营养调控手段，缓解热应激对动化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—物造成的负面影响，已受到越来越多的学者关注。Px)活力升高。Kim等研究发现，热应激后大鼠小鼠在急性热应激后，会出现急躁不安，心率肝脏中脂肪酸合酶和氧化还原类酶活力以及脂质加快，体表和直肠温度升高，身体水分蒸发加剧，过氧化物相关

6、的基因转录水平显著升高，MDA含进而导致脱水，血清渗透压升高，体重减少。量显著升高。本实验室研究发现，体表温度和直姜忠玲利用化学恒温培养箱对小鼠实施持续肠温度在热处理后都极显著高于热处理前；组织收稿日期：2014-03-01基金项目：国家自然科学基金(31272485)；青蓝工程；“十二五”国家科技支撑计划(2012BAD39B02)作者简介：周鑫(1988～)，男，浙江金华人，博士研究生，动物营养与饲料科学专业。E．mail：zhouxin_(2046@126．com}通讯作者：李春梅，教授，博士生

7、导师，E-mail：chunmeili@njau．edu．cn2780动物营养学报形态学观察发现，热处理导致小鼠肝脏组织充血TaKaRaPrimeScript固RTreagentKit反转录试剂盒和肝细胞水肿；小鼠肝脏MDA含量在热处理2d和TaKaRaSYBR@PremixExTaqTM定量试剂盒为较对照组显著升高，还原型谷胱甘肽(GSH)含量、日本TaKaRa公司产品；小鼠Nrf2特异性抗体购GSH—Px活力和T-SOD活力在热处理4和12d都自美国SantaCruz公司；小鼠HO—l特异性抗体购

8、有升高J。上述研究结果表明，小鼠热处理后，肝自武汉博士德生物工程有限公司；免疫组织化学脏中产生了显著的氧化应激。ABC染色试剂盒购自武汉博士德生物工程有限氧化应激是指机体在遭受各种有害刺激时，公司。体内高活性分子如ROS和活性氮自由基产生过1．2方法多，氧化速度超出氧化物的清除速度，氧化系统和1．2．1试验设计抗氧化系统失衡，从而导致组织损伤。过多的自50只6周龄雄性ICR小鼠[(35+1)g]随机由基会攻击蛋白质、脂肪酸、磷脂和核酸等生物大分为2组，每