肝细胞生长因子对自发性高血压大鼠心肌细胞凋亡的影响

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1、安徽医科大学学报ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2012Aug;47(8)·915·肝细胞生长因子对自发性高血压大鼠心肌细胞凋亡的影响鲍勇,王邦宁,胡泽平,程源,陈大年,刘敏,宋兵摘要目的探讨局部心肌注射重组腺病毒一肝细胞生长组织重构的作用,对心血管系统有重要的保护作因子(Ad—HGF)对自发性高血压大鼠(SHR)心肌细胞凋亡用。该实验通过局部注射重组腺病毒一肝细胞的影响。方法30只SHR为心肌纤维化模型,随机抽取6生长因子(Ad—HGF)基因,观察HGF局部高表达对只作为阳性对照组,其余24只再随机平分为腺病毒组、Ad—自发性高血

2、压大鼠(SHR)左心室心肌细胞凋亡的HGF组。腺病毒组、Ad—HGF组SHR开胸,左心室壁5点分影响,旨在探讨HGF在抗心肌细胞凋亡过程中对血别注射0.1mlnull-Ad5和5×10Pftt/mlAd5一HGF,术后两组管紧张素II(AngI1)、血管紧张素I/1型受体分别存活8只和1O只,于4周时处死其中6只。处死前测(AT1R)、Bax、Bcl-2及心室壁张力的作用关系。量左心室内压,ELISA法测定心肌HGF浓度,放射免疫法检测血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)浓度,免疫组化法及图像分析系统1材料与方法分析心肌Bcl-2和Bax水平,心肌细胞凋亡指数检测采用1.1材料

3、TUNEL,Westernblot法测定HGF、AT1R、Bcl一2和Bax的蛋白表达。结果与阳性对照组相比,Ad.HGF组左室内压表现1.1.1实验动物SPF级SHR30只,体重(200±为左心室舒张末压(LVEDP)下降(P<0.05)、左心室压力最10)g,14周龄,雄性,购自北京维通利华实验动物大下降速度(~dp/dt⋯)下降(P<0.05),左心室压力最大技术有限公司,动物编号:SCXK(京2006-0009)。上升速度(+dp/dt⋯)上升(P<0.05)。心肌HGF、抗细胞由安徽医科大学实验动物中心提供标准饲料,分笼凋亡蛋白Bcl-2显著升高(P<0.

4、05);AnglI、AT1R与促细胞饲养,每笼各3只,在恒温(22±4)qC条件下饲养。凋亡基因Bax水平,心肌细胞凋亡指数明显降低(P

5、Ang相似,是目前国际公认的最接近于人类原发性高血Ⅱ;Bax;Bcl一2压的动物模型。中图分类号R3321.1.2主要试剂Ad—HGF购于中国军事医学科文献标志码A文章编号1000—1492(2012)08—0915~05学院放射研究所。ELISA试剂盒(上海源叶生物科技有限公司);TUNEL凋亡试剂盒(武汉博士德生物在原发性高血压中,肾素一血管紧张素系统科技有限公司);小鼠抗人HGF、AT1R、Bcl-2、Bax单(renin—angiotensinsystem,RAS)的激活以及心室容克隆抗体(SantaCruz公司)。量和压力负荷的增加均可以诱导心肌细胞凋亡,

6、严1.2方法重的心肌细胞凋亡可导致相邻细胞移行,造成室壁变薄和室腔扩张,最终引发心衰¨j。肝细胞生长因1.2.1分组并处理30只SHR随机抽取6只作为阳性对照组,其余24只再随机平分为腺病毒组、Ad—子(hepatocytegrowthfactor,HGF)是一种问质细胞HGF组。腺病毒组、Ad—HGF组SHR称重后用10%来源的多功能细胞因子,具有多种生物学活性,有很水合氯醛(6ml/kg)腹腔注射麻醉,经口腔气管插强的促进血管内皮细胞有丝分裂、抑制细胞凋亡与管,接HX一小动物呼吸机(成都泰盟科技有限公2012—04—05接收司),SHR胸廓随呼吸机频率起伏提示插

7、管成功。基金项目:安徽省自然科学基金项目资助(编号:11040606M157、呼吸机参数设计为:呼吸频率7O~80次/分,潮气量1104O606Q20);安徽省高等学校省自然科学研究项目6~10ml,呼吸比l:2。在SHR左胸第3肋间处通(编号:KJ2011Z213)过2.5~3cm开口暴露心脏。将0.1ml5×10Pfu/作者单位:安徽医科大学第一附属医院心血管内科,合肥230022作者简介:鲍勇,男,主治医师,硕士研究生;mlAd.HGF通过注射的方式直接转染到左室游离王邦宁,女,教授,主任医师,博士生导师,责任作者,E.壁的5个点(腺病毒组注射0.1mln

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