缺氧预处理对自发性高血压大鼠心肌细胞内钙的影响

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1、缺氧预处理对自发性高血压大鼠心肌细胞内钙的影响作者：刘培庆饶曼人王金单位：刘培庆：山东省泰山医学院药理教研室；饶曼人南京医科大学心血管药理研究室(南京210029)；王金南京大学配位化学国家重点实验室关键词：低氧；高血压；大鼠；钙；蛋白激酶C；蛋白质类中国病理生理杂志/990704摘要目的：探讨缺氧预处理对后继缺氧再给氧所致心肌细胞内钙超载的影响及蛋白激酶C(PKC)和百日咳毒素(PTX)敏感的G・蛋白在缺氧预处理的作用。方法：循环灌流法分离自发性高血压大鼠(SHR)肥大心肌细胞，用Fura-2AM测定钙浓度。结果：[Ca2+_]。l.Ommol/L时，预处理组缺氧再给氧后其心肌细胞内游离钙

2、浓度[Ca2+]i为(194.0±24.8)nmol/L,未预处理组为(297.5±24.5)nmol/L；无外钙预处理组缺氧再给氧后其心肌细胞[Ca2+]i为(162.0±30.7)nmol/L,未预处理组为(236.5±28.3)nmol/L,提示缺氧预处理可减少缺氧再给氧所致心肌细胞内钙释放及外钙内流。在[Ca2+]o为1.0mmol/L组，于预处理前分别预先给予PKC拮抗剂Staurosporine(10nmol/L)及Gi-蛋白失活剂百口咳毒素(PTX,200ng/L),可见经后继缺氧再给氧后其心肌细胞[Ca2+]i分別为(264.8±19.3)及(258.0±27.7)nmol/

3、L,高于缺氧预处理组但低于未预处理组。结论：SHR肥大心肌细胞，缺氧预处理可减轻后继缺氧再给氧所致心肌细胞内钙超载；PKC及PTX敏感的G-蛋白可能部分参与缺氧预处理的保护作用。TheinfluenceofhypoxicpreconditioningoncytosolicfreecalciumconcentrationincardiomyocyteisolatedfromspontaneouslyhypertensiveratsLIUPei-Qing,RAOMan-Ren,WANGJin-XiDepartmentofCardiovascularPharmacology,NanjingMedi

4、calUniversity,Nanjing(210029)AbstractAIM：Toinvestigatetheinfluenceofhypoxicpreconditioningoncytosolicfreecalciumconcentration[Ca2+]iinmyocytesisolatedfromspontaneouslyhypertensiverats(SHR)andtostudytheactionsofGi-proteinandproteinkinaseCinthisprocess.METHODS：Myocyteswereisolatedbycirculating-perfus

5、ionwithcollagenaseandcytosolicfreecalciumconcentrationsweremeasuredusingFura・2fluorescencetechniquewithAR-CM-MICcationmeasurementsystem.RESULTS：Hypoxicpreconditioningcouldattenatetheincreasein[Ca2+]icausedbyhypoxiaandreoxygenationbothat1.0mmol/L[Ca2+]。andcalcium-freeHankssolution.Pretreatedwithpert

6、ussistoxinorstaurosporinecoulddecreasetheelevationof[Ca2+]i.CONCLUSION:HypoxicpreconditioninghaspreventingeffectoncalciumoverloadinhypertrophiedmyocyteandbothGi-proteinandproteinkinaseCwasinvolvedinthisprocess.MeSHAnoxia;Hypertensions;Rats;Calcium;ProteinkinaseC;Proteins近年來研究提示细胞内的信号转导异常在心肌吧厚的发生发展中

7、起着重要作用。细胞本身由特异的信号转导系统所调控，信号转导途径或相关分子表达异常，可引起细胞生长及功能失控，导致机体组织病理性改变。G-蛋白作为一族特殊的调节蛋白，以其特定方式偶联着膜受体与效应器，后者如腺昔酸环化酶、磷脂酶C及离子通道等，参与细胞跨膜信息传递，其中百日咳毒素(pertussistoxin,PTX)敏感的G-蛋白主要为抑制性G-蛋白(Gi-蛋白),参与心脏活动及功能的调节：蛋白激KC(prot