夏膝颗粒对自发性高血压大鼠心肌tgfβ1表达的影响

《夏膝颗粒对自发性高血压大鼠心肌tgfβ1表达的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、夏膝颗粒对自发性高血压大鼠心肌TGFβ1表达的影响【摘要】目的探讨夏膝颗粒对自发性高血压大鼠(SHR)心肌转化生长因子（TGFβ1）表达的影响及意义。方法50只12周龄雄性SHR随机分为5组：SHR空白组、阳性药组、夏膝颗粒高、中、低剂量组各10只，分别予以缬沙坦和不同剂量的夏膝颗粒灌胃；同时选取8只同周龄的雄性WistarKyoto大鼠(WKY)作为对照。给药8w后采用RTPCR法检测心肌TGFβ1mRNA水平。结果与WKY对照组比较，SHR空白组心肌TGFβ1/βactin吸光值之比显著升高（P＜0.01）；与SHR空白组比较，夏膝颗粒高剂量组能显著降

2、低SHRTGFβ1mRNA的表达（P＜0.01），甚至低于WKY组(P＜0.05)。结论夏膝颗粒可能通过下调心肌TGFβ1的高表达，抑制心肌细胞外基质的增生,防止心室重构。【关键词】夏膝颗粒；自发性高血压大鼠；心肌转化生长因子近年研究发现在高血压心室重构的形成过程中心肌转化生长因子(TGFβ1)参与了多种心脏的生理和病理过程，并在其发生发展中具有重要作用〔1〕。研究认为心肌细胞和心肌成纤维细胞(FBC)均有TGFβ1的表达，TGFβ61是胶原纤维和其他细胞外成分合成和沉积的强有力的始动因子，可刺激FBC大量增生及胶原、纤黏连蛋白基因的转录，同时对新合成基质的

3、降解有明显阻抑作用〔2〕。目前，中医药治疗高血压尤其对自发性高血压大鼠(SHR)心肌TGFβ1表达影响方面的报道较少，故本研究探讨了夏膝颗粒对SHR心肌TGFβ1表达的影响。　　1材料与方法　　1.1动物分组　　12周龄SHR50只,雄性,体重(200±20)g,同源性WKY大鼠8只，由北京维通利华公司提供。按体重用随机数字表法将50只SHR大鼠随机分成空白组、阳性药组、夏膝颗粒高、中、低剂量组,每组10只。　　1.2药物制备及给药方法　　夏膝颗粒(夏枯草、牛膝、茺蔚子3味,通化华夏药业有限公司提供)，缬沙坦(北京诺华制药有限公司提供)批号:X0355。实验时5组

4、动物每天按下列剂量灌胃给药1次：夏膝颗粒高剂量组9g·kg-1·d-1，夏膝颗粒中剂量组6g·kg-1·d-1,夏膝颗粒低剂量组3g·kg-1·d-1，阳性药组按0.013g·kg-1·d-1给予缬沙坦水溶液；空白组给同体积生理盐水。连续用药8w。6　　1.3逆转录聚合酶链反应(RTPCR)测定心肌TGFβ1mRNA的表达　　TGFβ1mRNA按照Trizol法提取总RNA，按照MMuLV逆转录酶说明书反转录成cDNA。以肌动蛋白(βactin)为内参照。受体引物序列根据国际互联网cDNA文库检索的原始序列参照文献设计，引物均由上海生工公司合成。TGFβ1

5、引物序列:上游引物5′GCTAATGGTGGACCGCAAC3′；下游引物5′GCAGTGAGCACTGAAG3′，产物340bp。βactin引物序列:上游引物5′TTGTCCCTGTATGCCTCTGGTC3′；下游引物5′GCTCATAGCTCTTCTCCAGGGAG3′,产物307bp。PCR反应条件：94℃变性5min，94℃变性30s→60℃退火30s→72℃延伸1min，共循环30次，72℃延伸10min。PCR产物电泳：2%琼脂糖凝胶电泳，DelDoc2000凝胶扫描仪扫描后，以TGFβ1/βactin的吸光值之比进行半定量分析，结果以光密度值(

6、OD)表示。　　1.4统计学处理　　采用SPSS13.0软件进行统计学分析,实验数据用x±s表示,组间数据比较用方差分析。　　2结果6　　1.WKY对照组；2.SHR空白组；3.阳性药组；4.夏膝高剂量组；5.夏膝中剂量组；6.夏膝低剂量组各组DelDoc2000凝胶扫描仪扫描结果见图1，各组TGFβ1/βactin的吸光值之比结果见表1。与WKY对照组比较，SHR空白组心肌TGFβ1/βactin比值显著升高（P＜0.01），表明SHR空白组大鼠心肌TGFβ1mRNA的表达增强；与SHR空白组比较，夏膝颗粒高剂量组能显著降低SHRTGFβ1mRNA的表达

7、（P＜0.01），甚至低于WKY组(P＜0.05)；阳性药组心肌TGFβ1mRNA的表达显著降低（P＜0.01），但与WKY对照组比较无显著差异（P＞0.05）；夏膝颗粒中剂量组TGFβ1mRNA有降低趋势，但与SHR空白组比较无显著性差异（P＞0.05），与WKY对照组比较亦无显著性差异（P＞0.05）。表1各组大鼠心肌组织TGFβ1mRNA表达比较(略)　　3讨论心室重构是由于一系列复杂的分子和细胞机制导致心肌结构、功能和表型的变化,包括心肌细胞肥大、胚胎基因表达、心肌细胞凋亡、心肌细胞外基质量和组成的变化〔3〕。本研究结果显示，SHR空白