盐负荷对自发性高血压大鼠胸主动脉胶原含量及tgfβ1表达的影响

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1、盐负荷对自发性高血压大鼠胸主动脉胶原含量及TGFβ1表达的影响:卫娜,牟建军,王宝莉,刘富强,黄强,张敏,蒋伟,吴冠吉【摘要】目的动态观察慢性盐负荷对自发性高血压大鼠(SHR)胸主动脉胶原含量及TGFβ1表达的影响,并探讨其可能的机制。方法80只SHR随机分为2组:4%(质量分数)高盐饮食组(高盐组,n=45)和0.4%(质量分数)正常盐饮食组(对照组,n=35),持续干预16周。每隔4周监测血压、尿量及尿钠。分别于实验第0、4、8、12、16周时随机分批处死SHR(每次每组6只),取胸主动脉行Masson染色,观察病理变化并计算主动脉胶原容积分数(CVF),免疫组化法测

2、定主动脉管壁转化生长因子β1(TGFβ1)的蛋白表达。结果①实验第4、8、12、16周,高盐组SHR主动脉CVF均较对照组增高[(8.02±1.21)%vs.(6.87±2.15)%,(10.35±2.07)%vs.(8.21±1.02)%,(16.20±1.58)%vs.(15.31±2.13)%,(19.37±1.816)%vs.(18.7±1.9)%,P<0.05]。②实验第4、8、12周时高盐组SHR主动脉TGFβ1的表达均较对照组增高[(8.02±1.21)%vs.(6.87±2.15)%,(10.35±2.07)%vs.(8.21±1.02)%,(16.

3、20±1.58)%vs.(15.31±2.13)%,P<0.05]。结论慢性盐负荷可使SHR胸主动脉的胶原含量增加,而局部TGFβ1含量的升高可能是其致胶原含量增加的重要原因之一。【关键词】高血压;盐负荷;胶原;转化生长因子β1 ABSTRACT:ObjectiveTomakeadynamicobservationontheeffectofchronicsaltloadingoncollagencontentinthoracicaortaandtheexpressionofTGFβ1inspontaneouslyhypertensiverats(SHR)andinv

4、estigatethepossiblemechanism.MethodsSHRs(80innumber,male,4-5lytoreceive4%(g/kg)highsalt(HSgroups,n=45)and0.4%loeandurinarysodiumexcretioneasuredeveryfourlyatthestartofthisstudy,4th,8th,12thand16the.Theaortaicroscope;microholographysystemetricfraction(CVF)oftheaorta.ExpressionofTGFβ1inSHRt

5、horacicaortaeasuredmunohistochemicalmethod.Results①CVFinthoracicaortaentofcollagenincrease.  KEYasson染色。Masson切片中测量胶原容积分数(CVF,为胶原面积与动脉总面积的比值),每个标本随即选取2~3个视野测量,分别取平均值作为各部位的测量值。  1.2.4免疫组化法检测主动脉TGFβ1表达石蜡切片脱蜡;水化后加30mL/L过氧化氢,室温孵育20min封闭内源性过氧化物酶活性,PBS冲洗;热修复抗原;100mL/L正常山羊血清室温孵育10min,消除背景染色;加入适量

6、一抗,工作浓度1∶100,4℃过夜,PBS洗;加生物素标记的二抗(生物素化山羊抗兔IgG抗体)37℃孵育20min,PBS洗;加辣根酶标记的链酶卵白素工作液孵育37℃30min,PBS洗;DAB显色,封片。胞质内有棕黄色颗粒为阳性,用ImageProPlus6.0图像分析系统进行分析,随机选取每张切片5个视野,测定其阳性染色的积分吸光度值(IA),取5个视野的平均值作为该切片的值。  1.3统计学方法所有计量资料以均数±标准差(±s)表示,使用SPSS13.0统计软件处理数据。组间比较采用多因素方差分析(Multifactoranalysisofvariance)。以

7、P<0.05为差异有统计学意义。  〖2〗西安交通大学学报(医学版)〖3〗第31卷  4期〖2〗卫娜,牟建军,王宝莉,等.盐负荷对自发性高血压大鼠胸主动脉胶原含量及TGFβ1表达的影响  2.3主动脉组织形态学的观察结果  2.3.1盐对SHR胸主动脉管壁胶原的影响随周龄增加两组大鼠的主动脉管壁CVF逐渐增多;实验第4、8、12、16周,与对照组比较,高盐组大鼠主动脉CVF增高(P<0.05,图1、表3)。  2.3.2盐对SHR胸主动脉TGFβ1表达的影响随周龄增加两组大鼠的主动脉TGFβ1表达逐渐增多,至16周

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