人参皂苷Rg3逆转人食管癌耐顺铂细胞Eca109／DDP的作用机制-论文.pdf

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1、解剖学研究2013年第35卷第5期AnatRes。2013，Vo1．35．No．5·论著·人参皂苷Rg3逆转人食管癌耐顺铂细胞Ecal09／DDP的作用机制李雪甫，王永实，刘艳文，徐秉忠(淮阴卫生高等职业技术学校消化道肿瘤实验室，江苏淮安223300)【摘要】目的研究人参皂苷Rg3(ginsenosideRg3，Rg3)对人食管癌耐顺铂细胞Ecal09／DDP的耐药性的逆转作用及可能机制，为提高食管癌化疗疗效提供新方法。方法应用MqT法及流式细胞检测Rg3和(或)顺铂(cisplatin，DDP)对细胞Ecal09／DDP增殖的影响；免疫组织化学法

2、及Westernblot印迹法检测细胞P糖蛋白(p-glyeoprotein，P—gP)的变化。结果Rg3显著降低了DDP对Ecal09／DDP细胞的Ic，逆转倍数为2．0倍，细胞周期分析显示，Ecal09／DDP细胞被阻滞在G期的数量显著增加；而Rg3和DDP联合作用肿瘤48h后P—gP表达水平显著下降。结论低细胞毒剂量Rg3可部分逆转Ecal09／DDP对食管癌的耐药性，下调的P．gP表达可能是逆转作用的机制之一。【关键词】人参皂苷Rg3；食管癌；顺铂；P．糖蛋白Reversingcisplatin-resistantofEcal09／DDPc

3、elllinebyginsenosideRg3LIXue-fu，WANGYong-shi，LIUYah—wen，XUBing—zhong．LaboratoryofDigestiveTractTumorofHuaiyinAdvancedVocational＆TechnicalSchoolofHealth．Huaian223300China【Abstract】ObjectiveToresearchtheroleandmechanismofginsenosideRg3onReversingcisplatin—resistantofEcal09／DDPce

4、lllinetoprovideanewmethodofesophagealcancer．MethodsByMTYandflowcytometrydetectcellproliferationafterGinsenosideRg3and／orcisplatin；ImmunohistochemistryandWesternblottingdetectthechangesofp-glycoprotein．ResultsGinsenosideRg3cansignificantlyreducetheIC50ofEcal09／DDPcells，andsigni

5、ficantincreaseinthenumberofthecellswerearrestedintheGIphase．ButginsenosideRg3combinedwithcisplatincansignificantlydecreasethep-glycoproteinexpressionoftumorafter48hours．ConclusionTheresistanceofEcal09／DDPcanbepartiallyreversedbythelowamountofcytotoxicagentsginsenosideRg3．Reduc

6、tionofp-glycoproteinexpressionmaybeoneofthemechanismsofthereversaleffect．【Keywords】GinsenosideRg3；Esophagealcancer；Cisplatin；p-glycoprotein以DDP为基础的含铂类化疗方案仍是目前囊Rg3由注射用水溶解后过滤配制成10mg／mL晚期食管癌等癌症患者主要治疗方案[1-2]，长期以的储存液，4℃保存备用。M1Tr(美国Amresco来，肿瘤的耐药性限制了化疗效果。我们探讨Rg30793)，DMSO(溶解Formazan

7、结晶)为上海久亿化对人食管癌耐DDP细胞Ecal09／DDP的耐药性的学试剂有限公司产品，细胞周期检测试剂盒由中逆转作用及对P．gP表达的影响，为提高食管癌化国南京凯基生物科技发展有限公司提供。疗疗效提供新方法。1．2方法1．2．1药物敏感实验MTI"法．以1xl0个／mL1材料与方法细胞密度接种于96孔板(200ILL)，细胞培养24h1．1材料后，加人适量药物(先单独Rg3敏感实验，然后选人食管癌耐DDP细胞Ecal09／DDP细胞由南择低毒剂量Rg3联合DDP进行逆转实验)，作用京凯基生物公司提供(采用中等剂量间歇作用法72h后加15IxLM

8、TF(5g／L)，37℃再孵育4h，结合低剂量持续作用法诱导获得)。为保持其耐药弃上清，每孔加入150IxLDMSO溶解．