中国对虾糠虾幼体病原哈氏弧菌的鉴定及毒力基因检测-论文.pdf

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1、第35卷第3期渔业科学进展V0l-35．No．32014年6月PR0GRESSINFISHERYSCIENCESJun．，2014中国对虾糠虾幼体病原哈氏弧菌的鉴定及毒力基因检测张晓君毕可然阎斌伦陈丽白雪松秦蕾(淮海工学院海洋学院，江苏省海洋资源开发研究院，连云港222005)摘要2011年春季对江苏连云港某对虾育苗场中国对虾Fenneropenaeuschinensis病死糠虾幼体分离到优势生长菌，对分离菌进行致病性、形态与生理生化特征及16SrRNA和gyrB基因同源性与系统发育分析。结果显示，引起糠虾幼体大量死亡的病原为哈

2、氏弧菌Vibrioharveyi，菌株kxl对中国对虾仔虾和日本对虾仔虾的半数致死量LD分别为2．0×10。CFU／ml和7．0×10CFU／ml。为进一步明确分离菌株毒力基因的携带情况，进行了分离鉴定的4株病原菌对群体效应调节基因(1uxR)、毒力调控基因(toxR)、溶血素基因(vhhA和vhhB)、金属蛋白酶基因(vhpA和曰)、毒力相关基因(toxS)、鞭毛结构基因(．aA)及锌金属蛋白酶基因(pap6)共9种毒力基因的检测，结果表明，4株病原茵均可检测到luxR、toxR、vhhA、vhhB和pap6毒力基因，扩增片段

3、大小分别为679、390、1324、216和355bp，其他4种毒力基因未检测到。分离鉴定的4株病原哈氏弧菌携带相同的毒力基因，这些毒力基因可作为检测致病性哈氏弧菌的生物学标记。关键词中国对虾；糠虾幼体；哈氏弧菌；毒力基因中图分类号$917．1文献标志码A文章编号1000-7075(2014)03—0105-07IdentificationandvirulencegenesdetectionofpathogenicVibrioharveyiisolatedfrommysisofFenneropenaeuschinensisL．Z

4、HANGXiao—junBIKe—ranYANBin—lunCHENLiBAIXue—songQINLei(CollegeofOcean，JiangsuMarineResourcesDevelopmentResearchInstitute，HuaihaiInstituteofTechnology，Lianyungang222005)ABSTRACTVibrioharveyiiswidelydistributedinthemarineestuarineenvironmentsandhasbeenwidelyrecognizedas

5、aprimarypathogenofmanycommerciallyculturedinvertebratespeciesovertheworld．Breedingseasonofspring，2011，theoutbreakofmassmortalityofmysisofFenneropenaeuschinensisL．occurredinahatcheryinLianyungang，JiangsuProvince．Inthisstudy，weisolatedandidentifiedthepathogenicbacteria

6、，analyzedthepathogenicityofisolatedstrains，anddetectedthepresenceofvirulencegenesofisolatedstrains．Dominantbacteriaisolatedfromthediseasedmysiswereidentifiedbasedonmorphologicalcharacteristics，physiologicalandbiochemicalcharacteristics，sequencessimilarityandphylogeni

7、cityanalysisofthe16SrRNAandgyrBgenes．Thephylogenetietreeswereconstructedusingtheneighb0r_j0iningmethod，andpathogenicityofthetestedstrainwasanalyzedbybathchallengeexperimentonpostlarvaeF．chinensisandP．japonicus，andvirulence江苏省水产三项工程项目(D2013．54)、江苏高校优势学科建设工程资助项目和连云港市科技

8、攻关项目(CG1134)共同资助收稿日期：2013-05-24；接受日期：2013-08-19作者简介：张晓君(1969．)，女，教授，博士，主要从事水产动物病害及病原微生物学研究。E—mail：zxj9307@163．COB，Tel：15861247889渔业