核磁共振波谱法测定b型流感嗜血杆菌荚膜多糖中的核糖含量-论文.pdf

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1、中国生物制品学杂志2014年8月第27卷第8期ChinJBiologicalsAugust2014，Vo1．27No．8·1081．技术方法核磁共振波谱法测定b型流感嗜血杆菌荚膜多糖中的核糖含量普元倩．一，朱文勇，寸怡娜，代小虎，张新文z，钟汉斌z，宋绍辉，吴亚楠，赵娜娜‘，王明清．一，廖国阳，李卫东1．昆明医科大学，云南昆明650550；2．中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所，云南昆明650118摘要：目的建立核磁共振波谱nuclearmagneticresonance，NMR)法测定b型流感嗜血杆菌

2、(Haemophilusinfluenzaetypeb，Hib)荚膜多糖中核糖含量的方法。方法利用NMR技术中的氢核磁共振波谱(-H—NMR)的定量功能，对不同浓度的D一核糖进行定量分析，验证该方法的精密度及准确度，并与传统化学方法进行比较。结果NMR法定量结果相对标准偏差(RSD)均小于1．0％，相对误差除最低浓度20mmol／L为7．4％fib，其余浓度均在1％～3％之间，不同浓度的样品回收率在97．2％～107％之间；化学法定量结果RSD在0．6％一7．9％之间，相对误差在3％～6．5％之间，不同浓度样品回

3、收率在93．5％一105．3％之间；两种方法检测的3批Hib荚膜多糖中核糖含量无明显差别，均在《中国药典》三部(2010版)规定的320～410mg／g之间。结论tH．NMR定量方法取样少，可直接定量，该方法精密度高、准确度高、重现性好，且不破坏多糖结构，可应用于细菌荚膜多糖质量控制的核糖定量。关键词：核磁共振波谱法；b型流感嗜血杆菌多糖；含量测定中图分类号：R378．4+10657．61文献标识码：A文章编号：1004．5503(2014)08—1081-05Determinationofriboseconte

4、ntinHaemophilusinfluenzatypebp0lysaccharidebynuclearmagneticresonancePUYuan-qian。，ZHUWen-yong，CUNYi·na，DAIXiao-hu，ZHANGXin-wen，ZHONGHan-bin，SONGSha~hui，WUYa-nan，ZHAONa-na，WANGMing-qing，LIAOGuo-yang，LIWei-dong"KunmingMedicalUniversity，Kunming650550，YunnanProvi

5、nce，ChinaCorrespondingauthor：LIA0Guo—yang。E—mail：liaogy@imbcams．corn．cn；LIWei—dDng，E—mail：1wd@imbcams．con．caAbstract：ObjectiveTodevelopamethodfordeterminationofribosecontentinHaemophilusinfluenzaetypebpolysaccharidebynuclearmagneticresonance(NMR)．MethodsD—rib

6、oseatvariousconcentrationswereanalyzedbythequantitativefunctionofH—NMR．Thedevelopedmethodwasverifiedforprecisionandaccuracy，andcomparedwiththetraditionalchemicalanalysis．ResultsTherelativestandarddeviations(RSD)ofresultsofquantitativeNMRwerelessthan1．0％，while

7、therelativeerrors，exceptthatofsamplesataconcentrationof20mmol／L(7．4％)，were1％～3％．Therecoveryratesofsamplesatva~ousconcentrationswere97．2％～107％．However．therelativestandarddeviations(RSDs)ofresultsofchemicalanalysiswere0．6％一7．9％，whiletherelativeerorswere3％～6．5％，

8、andtherecoveryratesofsampleswere93．5％～105．3％．ConclusionThesamplesforquantitativeNMRmethodareinasmallquantityandmaybequantifieddirectly．Withhighprecision，reproducibilityandaccuracy，themeth